Cu2+对杜仲愈伤组织诱导及增殖的影响研究

以杜仲嫩叶为外植体,诱导愈伤组织并进行增殖试验.在培养基中添加不同浓度的Cu2,研究Cu2对杜仲愈伤组织诱导及增殖的影响.结果表明:诱导培养基中附加1.0 mg/L的Cu2+时,有利于杜仲愈伤组织形成,诱导率最高.在增殖培养基中添加0.7 mg/L的Cu2+时,可明显改善愈伤组织的生长状态,增加愈伤组织增殖生长量.杜仲愈伤组织诱导率及增殖生长量随着Cu2+浓度的升高而逐渐升高,但当Cu2+浓度超过1.0 mg/L时,诱导率及生长量下降.     

Ca~(2+)-CaM系统与甜菜抗丛根病生理特性的关系

为研究信号分子钙在甜菜抗丛根病过程中的作用,用三种从不同位点阻断Ca~(2+)信号途径的抑制剂,即Ca~(2+)螯合剂EGTA(乙二醇双四乙酸)(5 mmol/L)、Ca~(2+)通道阻遏剂LaCl_3(5 mmol/L)和CaM拮抗剂W_7(N-氨乙基-5-氯-1-磺胺酰萘)(0.3 mmol/L),分别处理种植于甜菜丛根病三级病土中的甜菜,测定其抗氧化酶、O_2~-、H_2O_2及可溶性蛋白质的含量,结果表明:EGTA(5 mmol/L)、LaCl_3(5 mmol/L)和W_7(0.3 mmol/L)可降低超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性,增加O_2~-的积累和H_2O_2的含量,降低了可溶性蛋白质的含量.说明Ca~(2+)-CaM系统与甜菜抗丛根病性相关.     

外源H_2S和H_2O_2对NaCl胁迫下加工番茄幼苗生理特性的影响

为探明外源H_2S和H_2O_2对NaCl胁迫下加工番茄幼苗的生理调节作用,以耐盐性弱的KT-32和耐盐性强的KT-7这2个加工番茄品系为材料,采用盆栽法,设置0.5,1.5,3.0 mmol/L 3个H_2O_2浓度水平,研究50μmol/L H_2S和H_2O_2共处理对250 mmol/L NaCl胁迫下加工番茄幼苗的生长、渗透调节、物质积累和活性氧代谢的影响。结果表明,外源H_2S和H_2O_2共处理缓解了NaCl胁迫对加工番茄幼苗生长的抑制作用,使加工番茄幼苗仍保持较强的光合色素含量、较高的相对含水量和根系活力,降低了电解质渗出率、MDA含量、H_2O_2含量和O2-·产生速率,增强了加工番茄幼苗叶片中抗氧化酶SOD、POD和CAT活性,其中在2个品系中,50μmol/L H_2S和1.5 mmol/L H_2O_2共处理时可溶性糖分别比单独50μmol/L H_2S处理提高了24.0%和29.4%,脯氨酸含量分别提高了25.8%和21.3%,缓解盐胁迫效果最为显著。综上,外源H_2S和H_2O_2之间存在着一定程度的协同作用,可以诱导增强NaCl胁迫下加工番茄幼苗植株渗透调节能力、提高清除活性氧的酶促系统的防御能力,从而减弱加工番茄细胞内活性氧自由基对质膜的伤害,进而提高加工番茄幼苗对盐胁迫的适应性。其结果可为探讨H_2S和H_2O_2这2种信号分子协同作用、缓解加工番茄幼苗盐胁迫的生理机制提供理论依据。     

外源H_2O_2对百合小鳞茎生根发芽和内源激素含量的影响

为探究外源H_2O_2对‘西伯利亚’百合小鳞茎生根发芽的影响和对内源激素含量的调节,分别用0、0.5%、3%、5%、10%5种不同浓度梯度的双氧水(H_2O_2水溶液)及0.5 mmol/L DMTU(外源H_2O_2抑制剂)处理百合鳞片生小鳞茎,种植30天后统计分析。结果表明,5%浓度梯度H_2O_2处理下的百合小鳞茎生根发芽效果最好;0.5 mmol/L DMTU(外源H_2O_2抑制剂)处理效果最不理想;在百合小鳞茎生根发芽过程中内源激素脱落酸(ABA)的含量呈下降趋势,而赤霉素(GA)和生长素(IAA)的含量呈上升趋势,且变化幅度较对照明显,适宜浓度的外源H_2O_2对百合小鳞茎的萌发具有促进作用。     

喷施亚油酸对烟草胁迫抗性的影响研究

为探讨亚油酸能否提高烟草的胁迫抗性,检测了不同浓度的亚油酸喷施后,烟草叶片中抗氧化酶活性,活性氧、MDA、渗透调节物质的含量,以及抗逆和抗病相关基因的表达水平。结果显示,亚油酸处理降低了烟叶中的MDA含量,提高了脯氨酸、可溶性糖、H_2O_2含量和POD活性,增强了rbohD、rbohF、WRKY57、PR-1a、JAZ1和APX基因的表达水平,且大多在10 mmol/L时值最高。表明亚油酸能增强烟叶对胁迫的耐受性,且在10 mmol/L亚油酸处理时效果最佳。     

苦马豆抗盐愈伤组织突变系的筛选

本文以子叶外植体在MS培养基添加1.79 mg/L 2,4-D和1.15mg/L Kt诱导的愈伤组织为材料,添加不同浓度NaCl（100,200,280 mmol/L）下,经过不同时间（0,3,6,9天）胁迫处理,测定其可溶性蛋白含量、SOD和POD活性及丙二醛与脯氨酸含量,通过分析比较,筛选获得突变系的适宜盐浓度为200mmol/L NaCl。验证性试验表明, 200mmol/L NaCl胁迫下比100 mmol/L胁迫获得的抗性愈伤组织的数量多,而280 mmol/L胁迫下无抗性愈伤组织产生。本实验结果为获得抗盐再生植株及研究苦马豆的抗性机理奠定了基础。     

Ca2+对苹果果实过氧化物酶活性及其分泌的影响

以苹果组织为试材,试验结果表明,100mmol／L的高浓度Ca^2 能明显提高苹果果实POD活性,促进其分泌,低浓度Ca^2 的效果不显著;5mmol／L的EGTA促进POD分泌,对POD活性的影响不显著;10mmol／L的LaCl3明显降低POD活性,促进其分泌;0．1mmol／L的Verapamil、0．1mmol／L的CPZ和0.1mmol／L的TFP提高POD活性,但抑制POD分泌。这些说明苹果果实POD活性及其分泌可能受细胞内的Ca^2 和CaM所调控。     

光果甘草不同愈伤组织中总黄酮含量的比较

目的:研究不同激素组合、激素水平及添加物(水解乳蛋白)对光果甘草6种外植体愈伤组织中总黄酮含量的影响.方法:通过组织培养的方法获得愈伤组织,以芦丁为标准品,采用分光光度法于500 nm处测定愈伤组织中总黄酮的含量.结果:在附加6-BA 4.0 mg/L+ NAA 1.0 mg/L的MS培养基中,节间愈伤组织中总黄酮含量最高,为2.316%±0.015%.培养基中添加水解乳蛋白500 mg/L后极显著地增加了所有外植体愈伤组织中的黄酮含量;在附加了6-BA 1.0 mg/L+ NAA1.0 mg/L+水解乳蛋白500 mg/L的MS培养基中,节间愈伤组织中总黄酮含量最高,为2.376%±0.003%.结论:6-BA与NAA的激素组合,以及水解乳蛋白的添加,均有利于光果甘草愈伤组织总黄酮的生产.     

苦豆子愈伤组织培养及其药用成分含量测定

本研究利用组织培养技术考察外植体种类、激素水平、水解酪蛋白浓度等不同因子对愈伤组织的生长状态的影响;同时采用分光光度法和HPLC测定不同继代次数愈伤组织中总黄酮和槐定碱的含量。结果表明,苦豆子愈伤组织诱导的最适外植体是子叶;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,最佳继代培养基为MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 4.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L;总黄酮和槐定碱在第5次继代培养的愈伤组织中含量最高,分别为0.53%和0.0112%。因此,可选择第5次继代培养的愈伤组织作为苦豆子细胞悬浮培养的材料。     

6-BA和IBA对丹波黑豆愈伤组织黄酮产量影响研究

以丹波黑豆下胚轴为外植体,接种到1/2MSN6(MS无机盐 N6有机盐)上培养出一致的愈伤组织,将一定量的愈伤组织接种到不同浓度的6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)和IBA(吲哆-3-丁酸)组合的培养基上培养15天后,称重,计算愈伤组织生物产量,并取出烘干至恒重,称量其干重。提取愈伤组织中黄酮,分别测定芦丁和槲皮素的生物产量。结果表明:(1)2mg/L的6-BA处理,愈伤组织产量最高,高于其他浓度下的产量,6-BA与IBA相互作用对愈伤组织生物产量有显著影响;(2)2mg/L的6-BA处理,芦丁生物产量和含量最高,并显著高于其他浓度下的芦丁生物产量;(3)2mg/L的6-BA处理,槲皮素生物产量和含量最高,并且其槲皮素生物产量随培养基中IBA浓度的增加而降低;(4)愈伤组织生物产量与芦丁黄酮和槲皮素黄酮生物产量都存在显著的正相关;(5)愈伤组织中槲皮素生物产量和芦丁生物产量之间也存在着显著的正相关。     

不同耐旱性甘薯不同类型根系的抗氧化特性分析

为研究大田条件下甘薯不同类型根的抗氧化物质和抗氧化酶变化特性,揭示甘薯耐旱生理机制。本试验以耐旱性强的‘济薯21’(JS21)和耐旱性弱的‘济紫薯1’(JZS1)为材料,在遮雨棚中开展根系抗氧化特性动态变化研究。结果表明:在干旱条件下,JS21三类根系中的H_2O_2含量、O_2~-生成速率、Vc和多酚含量降幅均比JZS1大;在栽后70天前,JS21三类根系中SOD、CAT、POD、APX和PPO活性增幅比JZS1大,在栽后70天后,其根系中CAT、POD、APX和PPO活性降幅比JZS1小。纤维根中的H_2O_2含量和O_2~-生成速率最低,SOD、POD、CAT、APX和PPO活性最高;块根中H_2O_2含量最高,Vc和多酚含量及CAT、APX和PPO活性最低;柴根中O_2~-生成速率、Vc、多酚含量最高,SOD、POD活性最低。总之,栽后70天左右根系抗氧化能力最强,柴根中抗氧化物质含量最高,纤维根中抗氧化酶活性最高,耐旱性越强的品种抗氧化酶增加越快而降低越慢。     

外源硅对NaCl胁迫下玉米幼苗生理特性的影响研究

为明确外源硅对盐胁迫下玉米苗生理特性的影响。以K_2Si O_3·9H_2O为硅源,采用水培法研究盐胁迫下(100mmol/L)不同浓度硅对玉米幼苗抗氧化酶活性、可溶性蛋白及丙二醛含量的影响。结果表明,在中度盐胁迫下,外源硅对玉米幼苗SOD、CAT、POD活性均有促进作用,硅含量达0.6mmol/L时,其SOD、POD酶活性最强,比对照提高76%和125%;可溶性蛋白随外源硅浓度的增加,呈先上升后下降趋势;外源硅的存在还可以可以有效地降低植物体内MDA含量;说明硅能够缓解逆境对植物的胁迫。     

不同类型杜仲雄花茶活性成分的含量测定

采用紫外分光光度法和高效液相色谱法测定杜仲雄花茶中总黄酮、绿原酸及京尼平苷含量,探讨不同原料生产的杜仲雄花茶活性成分含量差异。结果表明,杜仲雄花茶中总黄酮、绿原酸及京尼平苷含量分别为1.89%～6.22%、0.06%～2.81%、0.06%～2.09%;不同类型杜仲雄花茶中各类活性成分含量有所差异,以花朵为原料生产的杜仲雄花茶中总黄酮含量和绿原酸含量均为最高,以花蕊为原料生产的杜仲雄花茶中京尼平苷含量最高,发酵杜仲雄花茶中各类活性成分含量均偏低。本研究可为开发不同保健功能杜仲雄花茶提供理论依据,有利于进一步推动杜仲雄花资源的开发利用。     

水杨酸对黄芩愈伤组织抗氧化酶活性及黄芩苷含量的影响

以黄芩种子为实验材料诱导出黄芩愈伤组织,在继代培养基中添加不同浓度水杨酸(salicylic acid,SA),研究水杨酸对黄芩愈伤组织生长、抗氧化酶活性及黄芩苷含量的影响。结果表明:不同浓度水杨酸的加入对黄芩愈伤组织生长和POD活性有一定抑制作用,水杨酸浓度为10μmol/L、50μmol/L时SOD活性高于对照;水杨酸浓度为50μmol/L时CAT活性最大,黄芩苷含量是对照的1.63倍,达26.88 mg/g。     

盐胁迫对桉树(Eucalyptus)活性氧代谢和CAT基因表达的影响

桉树耐贫瘠,盐胁迫影响桉树的生长速率,严重时造成桉树枯萎死亡。本研究以‘广林9’三月龄组培苗为材料,分别用不同浓度NaCl溶液(0, 30 mmol/L, 60 mmol/L, 90 mmol/L, 120 mmol/L, 150 mmol/L)处理20天后,检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性、过氧化物酶(peroxidase, POD)活性、过氧化氢酶(catalase, CAT)活性、过氧化氢(hydrogen peroxide, H2O2)含量、丙二醛(malonaldehyde, MDA)质量摩尔浓度等生理指标以及CAT基因的转录变化。NaCl处理后,MDA质量摩尔浓度、H2O2含量显著升高,在90 mmol/L或120 mmol/L处达到最大值;盐胁迫下POD、SOD和CAT活性均表现为先升高后降低的趋势,并且在90 mmol/L NaCl时达到最大值。设无NaCl处理下CAT基因的表达水平为1,用qPCR (real-time quantitative PCR)方法分析不同盐胁迫下6个CAT基因的相对表达水平。随着NaCl浓度增大,CAT1、CAT2和CAT3的相对表达水平呈逐渐降低的趋势,NaCl浓度为30 mmol/L相对表达水平最高,分别为1.54、6.38和1.27;CAT5和CAT6的相对表达水平在120 mmol/L NaCl时达到最大值,分别为2.65和2.21;CAT4的相对表达水平随NaCl浓度增大而增大,并在NaCl浓度为150 mmol/L时显著升高,相对表达水平达3.31。结果表明:90~120 mmol/L NaCl浓度为桉树的耐盐胁迫的极限;盐胁迫会引起桉树ROS (Reactive oxygen species)代谢失衡,积累H2O2导致膜脂过氧化;6个CAT基因在不同盐胁迫强度下的转录变化差异显著,响应机制不尽相同。本研究可为桉树应答盐胁迫机理研究和桉树栽培管理提供参考。     

玉米自交系H99与齐319幼胚愈伤组织诱导条件的优化

以优良玉米自交系H99与齐319为研究材料,采用正交试验设计L9(34),探讨了2,4-D、CaCl2、AgNO3三个因素不同浓度组合对玉米幼胚愈伤组织形成的影响.结果表明:2,4-D、CaCl2、AgNO3对两个自交系胚愈伤组织诱导率均有影响,其中H99所需2,4-D、CaCl2、AgNO3最佳浓度组合为2mg/L、5mmol/L、8mg/L或2mg/L、5 mmol/L、12mg/L；自交系齐319所需2,4-D、CaCl2、AgNO3的最佳浓度组合为2mg/L、4mmol/L、10mg/L或2mg/L、5mmol/L、10mg/L.本研究为基于这两个自交系的玉米遗传转化提供了优化的愈伤组织培养条件.     

外源SO2对紫苏种子萌发的影响

为了研究外源SO2对紫苏种子萌发及其幼苗生理生化的影响,用不同浓度的SO2（0,0.5,1,1.5,2,2.5 mmol/L）处理紫苏种子,使其在适当的条件下萌发,测定其种子的发芽率、发芽势及发芽指数,以及幼苗叶绿素、丙二醛（MDA）、过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）及可溶性糖含量。结果表明,随着SO2浓度的升高,发芽率、发芽势、发芽指数、POD活性和可溶性糖含量都呈先上升后下降的趋势,在1.5 mmol/L时达到最大;叶绿素含量随着SO2浓度的升高,呈逐渐上升的趋势;MDA含量、PPO活性则随着SO2浓度的升高,呈先下降后上升的趋势,在1.5 mmol/L时到达最低。实验表明用1.5 mmol/L浓度的外源SO2处理紫苏种子有利于其萌发和生长,可以提高幼苗的抗氧化胁迫能力。     

DMTU对香石竹切花花瓣水分胁迫的抗氧化效应

以香石竹切花马斯特品种为试材,以0、5 mmol/L、10 mmol/L三种浓度的二甲基硫脲(DMTU)作为瓶插液,对不同瓶插时期的香石竹切花花瓣细胞保护酶活性进行测定,以期从细胞膜保护酶水平上明确H2O2外源抑制剂DMTU改善香石竹切花应对水分胁迫能力的机理。实验结果显示:在瓶插前期用DMTU处理的超氧化物歧化酶(SOD)活性变化平稳,过氧化物酶(POD)活性显著高于对照,瓶插后期用DMTU处理的SOD活性、过氧化氢酶(CAT)活性均显著高于对照,POD活性低于对照,说明DMTU在瓶插早期主要对POD起到了保护作用,而瓶插后期主要对SOD和CAT起到了保护作用。对不同DMTU的浓度而言,浓度为10 mmol/L清除活性氧、维持保护酶活性的作用更强,但是10 mmol/L处理的瓶插寿命短于5 mmol/L处理,5 mmol/L处理的瓶插寿命长于对照,因此DMTU的处理浓度以5 mmol/L为宜。由此可见DMTU在香石竹切花衰老时可清除活性氧,提高保护酶活性,从而缓解水分胁迫带来的膜脂过氧化,延缓花瓣衰老进程,延长其瓶插寿命。     

NaN_3诱变对赤小豆种子萌发与幼苗抗氧化系统的影响

叠氮化钠(NaN_3)诱变是获得基因水平变异体的重要途径,了解叠氮化钠处理时间和处理浓度等基本条件是进行诱变育种的前提。本研究采用0.0,0.2,0.6,1.0,1.4,1.8mmol/L的叠氮化钠溶液浓度对赤小豆种子进行诱变处理,处理时间为16,20,24h。通过发芽率及相对发芽率确定叠氮化钠诱变赤小豆的适宜浓度和时间(半致死剂量LD 50)。此外,还对赤小豆M1代幼苗中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)以及过氧化氢酶(CAT)活性进行检测,探究叠氮化钠对赤小豆幼苗抗氧化系统的影响。结果表明:叠氮化钠对赤小豆诱变处理时间为20h时的半致死浓度为1.0mmol/L。叠氮化钠对赤小豆幼苗的SOD、POD活性表现为低浓度促进,高浓度抑制;对赤小豆幼苗的CAT活性有促进作用。当叠氮化钠浓度为1.0mmol/L时,赤小豆幼苗的SOD活性最高;而浓度为0.6mmol/L时,POD活性最高。     

外源脯氨酸对盐胁迫下大豆愈伤组织SOD和POD活性的影响

将大豆小真叶愈伤组织分别在NaCl浓度为0（ck），0.4%,0.8%,1.2%,1.6%及在各盐浓度中加脯氨酸（0.8mmol/L）的培养基中进行24，48，72h培养，测定其SOD和POD活性的变化。结果表明，外源脯氨酸对盐胁迫下大豆愈伤组织SOD和POD活性均有不同程度的促进作用。SOD活性在0.4%,0.8%,1.2%,1.6%盐浓度的各种培养时间下均受到促进，其中NaCl浓度为0.8%的增加较明显，POD在各种盐浓度下均在培养72h时，促进其活性增强的作用最明显。