桉蝙蛾高毒力白僵菌菌株筛选及鉴定

研究了分离自桉蝙蛾Endoclyta signifer Walke的6株白僵菌Beauveria spp.菌株的菌落生长、产孢量及孢子萌发率等生物学特性。结果表明,菌落生长最快的是菌株B-36,菌落直径为53.08±1.01 mm;产孢量最大的是B-77,产孢量为(29.80±1.95)×10~5个/mm~2;孢子萌发率最高的是B-41,GT_(50)值为13.74 h。对桉蝙蛾毒力最高的菌株是B-36,LT_(50)值为7.06 d。形态学及rDNA-ITS序列分析结果显示菌株B-36为球孢白僵菌Beauveria bassiana。     

感染油桐鹰尺蠖幼虫的优良白僵菌菌株筛选

油桐鹰尺蠖是危害速生桉树的重要食叶害虫之一,在我国南方大面积发生。为筛选出对该虫高效的生物防治资源,采用室内测定的方法测定6个不同来源的球孢白僵菌菌株(BbAX-07、BbFZ-51、BbFZ-58、BbMQ-08、BbMQ-02、BbQZ-05)生物学特性及其对油桐鹰尺蠖幼虫的致病力。结果表明:不同白僵菌菌株的菌落生长速度和产孢量间存在显著差异,菌落大小与产孢量呈正相关。BbFZ-58、BbAX-07菌株菌落直径和产孢量较其它菌株高,SDAY培养基上生长15d的菌落直径分别为6. 0、6. 3 cm,产孢量为1. 41×10~8、1. 35×10~8孢子·cm~(-2);接种这2个菌株15 d后,油桐鹰尺蠖幼虫校正死亡率分别达到96. 4%、90. 9%,僵虫率分别为73. 3%、71. 7%,致死中时(LT_(50))分别为4. 45、4. 72 d,均比其他菌株高。说明球孢白僵菌BbFZ-58、BbAX-07菌株对油桐鹰尺蠖的致病力强,可作为优良菌株进一步开发应用。     

球孢白僵菌Bb01菌株生物学特性研究

从受侵染的美国白蛾蛹体内分离出白僵菌菌落,并对该白僵菌菌落进行纯化,获得白僵菌纯菌落。采用生长速率法和悬滴法研究了不同湿度、紫外线、营养液和不同培养基对球孢白僵菌Bb01菌株营养生长和孢子萌发的影响。结果表明,球孢白僵菌Bb01菌丝生长和孢子萌发的最适温度为25℃,在此温度下,15h孢子萌发率在100%;在湿度为100%的条件下菌丝生长良好,孢子萌发率高;经紫外线照射18h孢子萌发率在0%～17.00%范围内,而对菌丝生长影响不大。     

桔小实蝇高致病性球孢白僵菌菌株的筛选

为筛选对桔小实蝇Bactrocera dorsalis（Hendal）有高毒力的球孢白僵菌Beauveria bassiana菌株,本文选取了对双翅目蝇类有致病性的球孢白僵菌菌株12株（Bb1824、Bb1840、Bb1853、Bb1981、Bb1995、Bb2003、Bb268、Bb853、Bb886、Bb1035、Bb1205、Bb2264）,通过菌落生长形状观察、产孢量测定、孢子萌发率的测定的方法筛选出菌株营养生长速度快、产孢量大、孢子萌发率高的优势菌株6株（Bb886、Bb1035、Bb1824、Bb1981、Bb2003、Bb1840）;再通过生物测定的方法,在6株优势菌株中筛选出了对桔小实蝇幼虫感染率最高、死亡率最高、LT50最小的Bb886菌株,该菌株对桔小实蝇幼虫的感染率为86.7%,校正死亡率达89.2%,在孢子浓度为2×107个/mL时的LT50仅为5.18天。     

球孢白僵菌Bb11菌株生物学特性研究

从受侵染的美国白蛾蛹体内分离出白僵菌(Beauveria bassiana)菌株,并对该白僵菌菌落进行纯化,获得白僵菌纯菌落。采用生长速率法和悬滴法研究了在不同湿度、紫外线、营养液和培养基条件下对球孢白僵菌Bb11菌株营养生长和孢子萌发的影响。结果表明,25℃时,球孢白僵菌Bb11在湿度为100%的条件下菌丝生长速度最快,孢子萌发率速度最高,在21h后萌发率能够达到100%;紫外线照射在30min以内时,对菌丝生长影响不大,但对孢子萌发有明显的延迟现象。     

23株白僵菌菌株生物学特性的研究

在PDA与虫粉-蛋白胨2种培养基以及1%葡萄糖+7%麦皮滤液中,对23株白僵菌菌株的菌落形态、菌丝生长、产孢量以及在不同温度、湿度下的孢子萌发率、抗紫外线能力等方面进行了试验。结果表明:菌落形态可分为3种类型;在2种培养基上,同一菌株及不同菌株在不同培养基上的产孢量也有差异,菌丝徒长的产孢量低;不同温度、湿度下,不同菌株分生孢子萌发率有明显差异。与其它菌株相比,Bpp、Be2、Bd5、Bbt1、Bpx2、Bpr3菌株萌发率高,表现出较好的耐高温和抗旱性以及抗紫外线能力。     

美国白蛾高毒力白僵菌菌株的紫外线诱变选育

【目的】对分离自美国白蛾幼虫虫尸的1株白僵菌菌株BH01进行紫外线诱变,以获得高毒力突变株,为美国白蛾的生物防治提供新的工程菌株。【方法】将白僵菌的孢子悬浮液置于紫外灯下进行诱变处理,诱变处理后获得的菌株进行培养后以产孢量超过原始菌株2倍以上作为依据筛选正向突变菌株,测定其对美国白蛾5龄幼虫的致病力,筛选高毒力突变株进行继代培养,研究其产孢量和致病力的稳定性。【结果】对原始菌株BH01经紫外线诱变处理后获得28个菌落,孢子校正死亡率为85.5%,将获得的菌落重新接种于PDA平板上得到产孢量高于原始菌株2倍以上的正突变株BH01-5、BH01-12、BH01-25。其中诱变菌株BH01-5对美国白蛾5龄幼虫的校正死亡率明显低于原始菌株,BH01-25与原始菌株相当,而BH01-12的校正死亡率和LT50值分别为原始菌株的1.30和0.68倍,具有显著差异。将突变株BH01-25和BH01-12继代培养6次,发现诱变菌株BH01-25菌株在继代过程中产孢量和致病力明显降低,表现出与原始菌株类似的趋势,但其产孢量始终高于原始菌株,另外,原始菌株培养第4代时即开始降低,BH01-25至第6代时才出现明显的降低,表现出了更好的稳定性。诱变菌株BH01-12在试验的6代继代培养过程中,无论产孢量还是对美国白蛾幼虫的致病力方面均未出现下降,且均明显优于原始菌株。【结论】经过对分离自美国白蛾幼虫的1株球孢白僵菌BH01进行紫外诱变,得到了产孢量和致病力均高于原始菌株的突变株BH01-12,该菌株经过继代培养后,其产孢量和致病力均未出现降低,表现出一定的遗传稳定性,具有很好的生产和应用前景。     

数值分类法筛选球孢白僵菌中心菌株

该文观察,测定了来源不同的球孢白僵菌２２个菌株的培养性状,产孢量,孢子萌发中时,水分活性,紫外照射活率,水浴活率等多个生物学及生态学指标,将培养性状编码后,。由所得的８个指标对供试菌株相关系数矩阵。     

粉拟青霉南北株系和白僵菌主要生理特性及毒力的比较

在 2 5℃条件下 ,粉拟青霉 (Paecilomycesfarinosus)南北株系和白僵菌 (Beauveiabassiana)在水滴中的孢子萌发率分别为 79 8%、6 7 2 %和 78 4%。而当RH为 90 %以下时 ,孢子萌发率急剧下降 ,白僵菌分生孢子萌发最适温度为 2 5℃ ,粉拟青霉均为 2 0℃ ;15℃以上时 ,S -Pf菌株萌发率高于N -Pf菌株 ,15℃以下相反。在PDA培养基上 ,粉拟青霉南北株系产孢量基本相同 ;N -Pf最适生长温度 ;产孢温度为 2 0～ 2 5℃ ;S -Pf则为 2 0℃ ;在 2 0℃以上 ,Bb对马尾松毛虫的感染率高于粉拟青霉 ,但在 15℃以下 ,粉拟青霉则明显高于白僵菌。     

淡紫拟青霉T-DNA插入突变体的表型分析

研究淡紫拟青霉T-DNA插入突变体,鉴定突变体的表型特征,为淡紫拟青霉致病机制分析及致病相关的基因克隆奠定基础。PCR检测筛选的14株T-DNA插入突变体,观察和测定菌落形态,菌落生长速率,产孢量,孢子萌发率和菌丝干质量等生物学性状,并比较突变体致病力。结果表明突变体均含有beta-tubulin基因序列,T-DNA已整合进入野生型菌株20-7的基因组中。通过与野生型菌株对比,发现突变体菌落形态发生了不同程度的改变。菌落生长速率明显增大的菌株占全部菌株的85.71%,只有BN-11菌株的菌落生长速率降低。产孢量显著变大的菌株有BN-11和BN-12,为菌株总数的14.29%。孢子萌发率发生改变的菌株占78.57%。菌丝干质量发生明显增大和减少的菌株都占全部突变体的21.43%。筛选获得了1株致病力增强的突变体BN-11和11株致病力显著降低的突变体。     

刚竹毒蛾白僵菌优良菌株筛选及生产应用研究

本研究对天然刚竹毒蛾僵虫蛹分离纯化的 8个球孢白僵菌菌株 ,进行了菌落形态、菌落生长、产孢量和发芽率等培养性状测定 ,并与 4个马尾松毛虫球孢白僵菌菌株进行了室内外防治刚竹毒蛾试验比较 ,结果表明 :菌株间的培养性状和毒力有明显差异 ,各菌株存在较明显的寄主专化性 ,分离自刚竹毒蛾的菌株毒力较高。筛选出BP4和BP1 2个优良菌株 ,具有菌丝生长速度快 ,产孢时间短 ,产孢能力强 ,毒力高等优点 ,并将最优的BP4菌株应用于生产 ,菌粉平均含孢量达 2 3 8 7×1 0 8·g- 1 ,平均孢子发芽率达 96 2 % ,林间防治越冬代刚竹毒蛾平均效果达 92 3 % ,取得良好的防治效果。     

杨扇舟蛾幼虫高毒力绿僵菌菌株筛选研究

测定了21株绿僵菌的平板单菌落生长和产孢量情况,证明(Ma1,Ma42,Ma788,Ma789)4菌株产孢量高,通过对这4株绿僵菌菌株的不同温度水浴处理,发现了孢子的萌发条件;并开展了4菌株对杨扇舟蛾幼虫的毒力测定,筛选出Ma789菌株的致病力较强。     

杨树舟蛾优良白僵菌菌株的筛选及林间不同剂型防治试验

为了有效控制杨树舟蛾的危害,对林间采集的7种白僵菌进行优良菌株的筛选,并应用筛选出的优良菌株进行不同剂型、不同施菌量的林间防治研究.结果表明,杨树舟蛾优良菌株Bjy,在菌落形态、生长速度、产孢量、孢子萌发率以及毒力方面,均表现出较其他同期菌株优良的性状,产孢量为3.81×108个·cm-2,分生孢子在24 h内萌发率达96.67%,在毒力方面,20 d幼虫校正死亡率达94.4%,处理僵虫率达92.2%;对杨树舟蛾最好的剂型是超低量油剂和超低量复合油剂,其中超低容量油剂以施菌量1.5×1013或2.0×1013个·hm-2为宜,校正死亡率达95.4%和100%,白僵率达84.6%和90.2%,树叶受害率39.7%和32.3%;超低量复合油剂以施菌量1.0×1013个·hm-2的油剂中添加3.0 mL·hm-2的杀灭菊酯为最佳,校正死亡率达93.8%,白僵率达67.9%,树叶受害率26.1%.     

球孢白僵菌菌株抗紫外线能力与毒力的关系

实验证明紫外光对球孢白僵菌孢子的影响表现为两个方面，一方面导致孢子活率降低，另一方面造成孢子萌发延迟，从而表现为菌株毒力下降。两者和毒力的相关性分别为０．８２９３及－０．８４４８，均达极显著水平。     

球孢白僵菌Bb09菌株在美国白蛾僵虫体及其周围土壤中宿存动态

为弄清白僵菌在林间的流行规律,以球孢白僵菌Bb09菌株为研究对象,模拟自然条件,研究其在感病美国白蛾僵虫体及其周围土壤中的宿存动态。结果表明,白僵菌在越冬僵虫体上始终能保持较高的宿存水平,携孢量保持0.39×109个以上,萌发率均保持在95%以上;白僵菌在土壤中的宿存量变化较大,整体呈现与僵虫体上携孢量互补的消长动态变化;白僵菌在僵虫体周围土壤中成菌落数保持在0.11×108~1.89×108 cfu之间。     

不同宿主的白僵菌菌株分离及特性研究

以9株白僵菌菌株为材料,对其进行分离鉴定并探讨菌株的生物学特性。结果表明:有1株为布氏白僵菌(Beauveria brongniartii),8株为球孢白僵菌(B.bassiana)。结合白僵菌菌落特征、营养生长情况和产孢量来看,2号和3号菌株比较适合应用于生产。     

金龟子绿僵菌、球孢白僵菌不同菌株对星天牛成虫的生物测定

在测定8株虫生真菌产孢量的基础上，选用4株金龟子绿僵菌和1株球孢白僵菌菌株，采用爬行接种法对星天牛成虫进行生物测定，旨在筛选出对星天牛成虫具有强致病力的生产菌株。星天牛成虫在产孢充分的平皿上爬行后所接触到的孢子量差异不显著。接种后不同菌株对星天牛成虫的致死趋势较一致，死亡高峰期在9～15d。通过死亡率一时间几率值分析发现，MaYTTR04，MaZPTR01，t3083个菌株的LT50分别为9．14，9．48，9．67d，较另2个菌株要短。最高僵虫率的菌株是MaZFrrR01，为53．3％；其次是MaYTTR04，为40．0％；其余3个菌株均较低。试验结果表明MaYTTR04，MaZPTR012个菌株对星天牛有较高的致死率，僵虫率也较高，可以作为优良菌株进一步的研究、推广。     

不同球孢白僵菌菌株对星天牛幼虫的致病力

为筛选出可用于星天牛生物防治的高致病力菌株,测定了8株球孢白僵菌菌株(Bb Ma A-01、Bb MQ-04、Bb MQ-07、Bb QZ-01、Bb QZ-02、Bb YXTR-03、Bb TK-02、Bb XJ-11)的生长速度和产孢量及其对星天牛幼虫的致病力。结果表明:不同球孢白僵菌菌株的生长速度、产孢量和对星天牛幼虫致病力差异十分显著。采用浸渍法接种15 d后,不同球孢白僵菌菌株对星天牛幼虫累计致死率(幼虫死亡率)在70%~100%之间,其中Bb XJ-11、Bb QZ-02菌株对幼虫的累计死亡率最高,均达100%;且接种后星天牛幼虫的僵虫率(感染率)也分别高达90%、80%;致死中时(LT50)较短,分别为5.38 d、5.83d。研究结果表明Bb XJ-11、Bb QZ-02菌株对星天牛幼虫的致病力较强,同时2个菌株的生长速度快、产孢量高,故可作为防治星天牛的优良菌株加以推广应用。     

球孢白僵菌菌株抗紫外线能力与毒力的关系

实验证明紫外光对球孢白僵菌孢子的影响表现在两个方面,一方面导致孢子活率降低,另一方面造成孢子萌发延迟,从而表现为菌株毒力下降。两者和毒力的相关性分别为０．８２９３及－０．８４４８,均达极显著水平。     

不同来源绿僵菌对油桐鹰尺蠖幼虫的致病力比较

油桐鹰尺蠖Biston suppressaria (Guenée) 是一种杂食性食叶害虫,近年来在速生桉树林分中大 面积发生,造成较大的损失。文中研究了不同来源金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae 菌株生长与产孢 特性及对油桐鹰尺蠖幼虫的致病力,旨在筛选出高效防治该虫的生物资源。试验结果表明：不同来源的 绿僵菌菌株间菌落生长速度和产孢量差异显著,MaZPTR-01 菌株15 d 的菌落直径为6.5 cm,显著较其它 菌株大;MaFZ-13 和MaZPTR-01 菌株培养15 d 产孢量最高,分别为1.33×108 孢子· cm-2 和1.28×108 孢 子· cm-2。致病力测定结果表明：不同菌株对油桐鹰尺蠖幼虫的致病力存在显著差异,其中接种MaFZ-13 和MaZPTR-01 菌株的幼虫校正死亡率、僵虫率均较其它菌株高,接种后15 d 幼虫校正死亡率分别达到 94.5%、92.7%,僵虫率分别为75%、61.7%;这2 个菌株的致死中时（LT50）显著比其它菌株短,分别为 4.34 和4.52 d。绿僵菌MaFZ-13 和MaZPTR-01 菌株对油桐鹰尺蠖幼虫的致病力强,且具有良好的生产性 状,可作为该虫的生物防治资源进一步开发应用。