不同灵芝菌株富硒能力的比较研究

通过在不同浓度富硒PDA平板培养基上灵芝菌丝的生长情况及在添加了亚硒酸钠的液体培养基中进行摇瓶培养,测定灵芝菌丝体的生物量及总富硒量,比较不同灵芝菌株的富硒能力,最后从15个不同灵芝生产菌株中筛选出一株对高浓度硒有很好耐受能力且富硒能力强的菌株惠州灵芝。在适宜的条件下进行液体摇瓶培养,7d后其菌丝体的硒含量为2386μg/g,总富硒量为3784.2μg/100mL。     

加镧液体培养灵芝菌丝富集有机硒的研究

研究了稀土元素镧（La）对灵芝菌丝体富集有机硒的影响。结果表明,镧能有效促进灵芝菌丝富集有机硒,当发酵培养基中镧的添加浓度为100mg／L时,菌丝产量和硒转化率最高。正交试验结果表明,各因素中对灵芝菌丝体富硒影响最大的是镧浓度,其次是硒浓度、培养时间和pH值,最佳发酵条件是镧浓度100mg／L,硒浓度100mg／L,pH值4．5,培养时间7d,在此条件下菌丝体产量47．3g／L,硒转化率88．1％。     

响应面法优化蛹虫草液体发酵配方及条件的研究

蛹虫草是一种珍稀的药食两用真菌,为提高其菌丝体的液体发酵效率,首先通过单因素试验确定了蛹虫草液体发酵的最优碳源、氮源及适宜培养的pH、温度、装液量和转速6个因素。然后采用Plackett-Burman试验设计,确定葡萄糖、牛肉膏、温度是影响蛹虫草液体发酵菌丝体生物量的关键因素。利用响应面法设计三因素三水平试验,最终获得蛹虫草菌丝体液体发酵的最佳配方及条件为：牛肉膏13.34g/L、葡萄糖20.00g/L、MgSO₄ 1.5 g/L、KH₂PO₄ 1.5 g/L,pH 6.5,摇床转速150 r/min,温度27℃。验证试验表明,优化后条件培养的菌丝生物量可达1.489 g/105 mL,是优化前的2倍,与模型预测值基本一致,优化效果较好,可为蛹虫草液体深层发酵培养及后续工厂化生产提供技术参考。     

黑木耳液体发酵条件优化研究

以黑木耳1703为供试菌株，采用单因素试验，研究碳源、碳源质量浓度、氮源、氮源质量浓度、接种量、培养基初始pH、摇床转速对黑木耳菌丝体生物量的影响；用正交试验研究葡萄糖、蛋白胨和培养基初始pH对菌丝体生物量的影响。结果表明，葡萄糖、蛋白胨、培养基初始pH对菌丝体生物量影响显著，液体发酵的最佳条件：葡萄糖20 g/L，蛋白胨3 g/L，培养基初始pH为6，接种量为8%，摇床转速为150 r/min。结果为黑木耳1703液体菌种的培养应用提供参考。     

卫星灵芝2号深层发酵条件优化

对卫星灵芝2号菌株的液体深层发酵培养基及培养条件进行了研究。结果表明:最佳发酵培养基为:葡萄糖3%,豆饼粉1.5%,酵母膏1%,磷酸二氢钾0.1%,硫酸镁0.05%,VB11片/L,pH6.0。最佳摇瓶发酵条件为:发酵周期48h、接种量10%,装液量100mL,摇床转速180r/min,温度29℃,初始pH6.0。发酵条件优化后,菌丝体干重可达1.63g/100mL。     

沙漠乔桑木屑栽培富硒灵芝研究

以沙漠乔桑木屑为主料，通过添加亚硒酸钠来培养富硒灵芝，结果表明，添加硒量200-1200μg/g，得到了含硒量在26．8-52．2μg/g的富硒灵芝。亚硒酸钠添加量在400μg/g时，灵芝的硒产量最高。相同条件下以棉子壳为主料作对比，其富硒量不及以乔桑木屑为主料的，而单位重量的两种主料灵芝产量没有显著差异。故沙漠乔桑是一种适合培养富硒灵芝的优良的培养基主料。     

灵芝液体发酵培养条件的响应面法优化研究

为获得更多的灵芝菌丝体产量,以单因素摇瓶试验法研究了发酵温度、发酵时间、发酵液的初始pH对灵芝液体深层发酵的影响;在此基础上,利用响应面法优化了灵芝液体发酵条件。结果表明:这3个因素对菌丝体产量的影响由大到小依次为发酵液的初始pH、发酵时间、发酵温度,而当发酵温度为28.7℃、发酵时间为124h、发酵液的初始pH为5.9时,获得的菌丝体产量最大,为22.89g/L,预测值与实测值吻合得较好。     

卫星灵芝2号摇瓶发酵培养条件的研究

以菌丝体生物量及发酵培养性状为主要指标,对卫星灵芝2号菌株种子摇瓶发酵培养条件进行研究。结果表明最适宜的配方为玉米面1.5%,麦芽糖1%,酵母膏1%,磷酸二氢钾0.1%,硫酸镁0.05%,VB1 1片/L,pH 6.0;摇床转数180 r/min,培养温度29℃,培养终止时间为5-6 d,此时发酵液菌丝体干重可达1.3 g/100 mL。     

虫草液体深层发酵富硒的研究

研究了不同硒浓度、培养时间、pH、培养基种类等因素对虫草菌丝体生长量、富硒量、有机硒转化率的影响，探讨了虫草菌富硒的最优培养条件。结果表明其最优富硒培养条件为：培养基硒浓度60μg／mL，培养时间5d，pH6，培养基为麸皮培养基（％）：蔗糖3，麸皮2，NaN030．2，KH2V040．5。菌丝生长量最高可达1．916g/100mL，有机硒含量可达509．026μg／100mL。虫草有机硒转化率最佳培养条件为：培养基硒浓度20μg／mL，培养时间5d，pH7，培养基为马铃薯培养基（％）：蔗糖3，马铃薯20，NaNCh0．2，KH2PO40．5。其有机硒转化率最高可达18．44％。低浓度的硒可以刺激菌丝体生长，高浓度的硒对菌丝体生长有抑制作用，使有机硒转化率降低。     

4种食用菌硒积累能力比较与硒形态研究

对杏鲍菇(Pleurotus eryngi)i、灵芝(Ganoderma lucidum)、云芝(Coriolus versicolo)r和鸡腿菇(Coprinus coma-tus)4种食用菌进行一级液体富硒培养,采用原子荧光光谱仪(AFS)对富硒菌丝体进行总硒含量的测定,液相色谱-原子荧光光谱仪联用(LC-UV-AFS)对富硒菌丝体中硒形态进行分析,结果显示,在一级液体培养中添加50mg.L-1Na2SeO3条件下,杏鲍菇无论生物量、总硒含量还是硒利用率都是最高的,分别达到了9.8g.L-1、5 086μg.L-1和22.3%,灵芝次之,分别是6.7g.L-1、4 426μg.L-1、19.4%。硒形态分析结果揭示,在杏鲍菇菌丝体蛋白酶提取液中硒代蛋氨酸、硒代胱氨酸和硒甲基硒代半胱氨酸3种硒代氨基酸总量比较低,不足提取液总硒30%,而其他三类食用菌3种硒代氨基酸总量达到80%以上,且在4种食用菌菌丝体提取液中,硒代蛋氨酸是硒与氨基酸的主要结合形式。研究及相关文献表明灵芝是食用菌中最具潜力的富硒材料。     

响应面法优化蛹虫草菌液体发酵条件

以蛹虫草菌(Cordyceps militaris)为试材,用单因素试验筛选适宜温度后,利用响应面法优化培养基,最后用优化的条件和培养基进行摇床6d和摇床6d+静置培养10d的液体发酵试验,研究不同培养条件下蛹虫草菌液体发酵后菌丝体产率以及静置培养对虫草素积累量的影响。结果表明:蛹虫草菌适宜温度为25℃,优化培养基为蔗糖4.34%、酵母粉3.06%、硫酸亚铁0.027%、磷酸二氢钾0.2%、硫酸铵0.04%、硫酸镁0.13%、维生素B10.08%、硫酸锌0.06%;摇床6d和摇床6d+静置10d后,发酵液中的菌丝体产率分别为2.568g/100mL和3.389g/100mL,后者菌丝体产率比初始培养基增加了1.73倍,而虫草素积累量分别达到568.329μg/mL和862.893μg/mL,后者比初始培养基中增加了1.56倍。     

四种食用菌富硒能力的比较研究

研究了金针菇、香菇、猴头菌和灵芝在液体深层培养中的富硒能力。测定了不同硒浓度(从10μg/g～500μg/g)下四种食用菌的生长状况及最大富硒能力;研究了四种食用菌在富硒深层培养中菌丝干重、还原糖及菌丝内有机硒含量的变化。分析结果表明,四种食用菌都有不同程度的富硒能力,灵芝的富硒能力最强,是其他三种食用菌的10～20倍,对硒的耐受能力可达500μg/g,菌丝内有机硒含量最高达8000μg/g。     

蛹虫草菌丝体循环富硒法的建立及其硒多糖抑癌作用初探

研究富硒蛹虫草菌丝体循环富硒作用及该法获取的硒多糖对人宫颈癌细胞Hela的抑制作用.采用循环富硒法获得蛹虫草富硒菌丝体并制备硒多糖,经硒定量和多糖含量测定后采用MTT.法检测硒多糖与正常蛹虫草多糖(12.5、25、50、100、200μg/mL)作用Hela细胞72 h后细胞存活率的变化.循环富硒法可有效促进蛹虫草菌丝体对硒的富集,硒含量为680.2μg/g,多糖含量为47.4%;硒多糖与正常蛹虫草多糖(100μg/mL)对Hela细胞的抑制率分别为91.87%和77.98%.其IC50分别为18.5μg/mL和48.5μg/mL.循环富硒法可有效制备富硒蛹虫草菌丝体和硒多糖,循环富硒法获取的硒多糖能有效的抑制Hela细胞的增殖.     

红栓菌多糖对无机硒的生物转化

本论文进行了红栓菌对硒的耐受力及其菌丝体多糖对硒富集作用的研究。结果表明，红栓菌具有较强的富硒能力，在发酵培养基中添加硒浓度达到20μg／mL时，对菌丝体生长的抑制率最小，菌丝体干重和多糖含量达到最大值，分别为4.3mg／mL和29．8mg／g同时进行了红栓菌多糖富硒的发酵务件优化：pH5．5，接种量10％，装液量80mL／500mL三角瓶，28℃，200rpm培养3d，在发酵起始加入硒溶液，菌丝体多糖及多糖中硒含量分别达到27．3mg／g和816．7μg／g，多糖对无机硒的转化率为34．2％。     

白色金针菇液体发酵培养条件的优化

以白色金针菇为试材,以菌丝体生物量、密度、萌发时间等为考察指标,采用单因素试验及L9(34)正交实验对影响其液体摇瓶培养时的条件因素(培养基的初始pH、接种龄、接种量、摇床转速)进行优化,以实现白色金针菇摇瓶液体菌种高密度发酵。结果表明:适宜的摇瓶培养条件为培养基初始pH 6.5,接种龄102h,接种量10%,摇床转速140r·min~(-1)。在上述条件下,金针菇菌丝体生物量达到17.93 g·L~(-1),密度104.21个·mL~(-1),直径1.35mm,萌发时间8h。     

八种灵芝菌株的比较及筛选

比较了8个灵芝菌株的菌丝生长速度、菌丝体生物量及多糖含量等指标。试验结果表明,在PDA培养基上,沂山灵芝菌株菌丝生长速度最快,为9．91mm／d;经150r／min、25℃液体摇床培养10d后,安丘大灵芝菌株获得的菌丝体生物量最高,为1．22g／100mL;济宁圆芝菌丝体中的多糖含量最高,为117．59μg／mg。经过综合分析比较,初步认为沂山灵芝为优势菌株。     

香菇液体菌种发酵条件的优化

对香菇ZHX-1液体培养得到的菌丝球和胞外多糖含量的影响因素进行了试验。在单因素试验的基础上,采用正交试验设计,结果表明,最佳液体发酵条件为玉米粉21 g/L,酵母膏5 g/L,KH_2PO_4 1 g/L,MgSO_4 0.5 g/L,pH4.5,培养温度25℃,摇床转速150 r/min,接种量8.5%,装液量100 mL/250 mL,培养7 d,增菇激活酶的添加量0.2%。在此优化条件下,香菇菌丝球的生物量为2.54 g/L,胞外多糖的含量为2.34 g/L。     

平菇菌丝富硒培养条件的优化研究

对平菇菌丝富硒培养进行单因子试验，在此基础上进行了富硒发酵条件的正交试验研究。结果表明：葡萄糖质量分数1．5％，亚硒酸钠质量浓度8．0mg／L，起始pH7．0，培养时间5d，平菇菌丝富硒量得到最大，为331．49μg／g菌丝。     

槐耳菌液体培养富硒的研究

当发酵培养基中的硒浓度达到20μg/mL时。对菌丝体生长的抑制率最小，多糖含量达到51．3mg／g。同时进行了槐耳菌富硒条件的优化：pH5．5，接种量10％。装液量80mL/500mL三角瓶。28℃。200r／min发酵培养9d。且在发酵第5d加入硒溶液。槐耳多糖含量达到50．3mg／g，多糖中硒含量达到761．9μg／g，多糖对硒的转化率达到35．8％。     

富硒灵芝菌丝体对小鼠免疫功能的影响

应用自制的富硒灵芝菌丝体给BALB／C小鼠灌胃，观察富硒灵芝菌丝体对小鼠免疫功能的影响．更进一步了解富硒灵芝的应用价值。试验结果表明，富硒灵芝菌丝组与正常对照组和正常灵芝菌丝组比较明显的提高了小鼠的巨噬细胞的吞噬功能、淋巴细胞转化率和溶血素抗体的产生，即能增强小鼠的非特异免疫又能增强小鼠的特异性免疫。