中国水仙NtFT2正义基因表达载体的构建与愈伤组织遗传转化体系的建立 |
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引用本文: | 冯 莹,朱里莹,丁安琪,潘东明. 中国水仙NtFT2正义基因表达载体的构建与愈伤组织遗传转化体系的建立[J]. 中国农学通报, 2016, 32(10): 162-168 |
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作者姓名: | 冯 莹 朱里莹 丁安琪 潘东明 |
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作者单位: | 泉州师范学院资源与环境科学学院,福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所,福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所,福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所 |
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基金项目: | 国家十一五科技支撑计划项目“台湾农业新品种、新技术引进创新研究与示范”(2007BAD07B01);福建农林大学创新团队项目“园艺植物种质与高优生产技术创新”(cxtd12013)。 |
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摘 要: | 构建中国水仙Nt FT2正义基因表达载体,为进一步研究Nt FT2基因对中国水仙芽休眠调控作用提供参考;建立中国水仙愈伤组织遗传转化体系,为中国水仙愈伤组织遗传转化提供技术平台。笔者以中国水仙主芽为材料,通过PCR扩增获得Nt FT2基因;通过PCR、双酶切、连接等方法将Nt FT2基因正向插入到p CAMBIA1301双GUS植物表达载体构建Nt FT2正义基因表达载体P1301-FT2,再通过冻融法将重组质粒P1301-FT2导入根癌农杆菌。采用根癌农杆菌介导法将Nt FT2正义基因转化中国水仙愈伤组织,采用GUS组织化学染色法检测中国水仙愈伤组织遗传转化效率。结果表明,试验成功构建了中国水仙Nt FT2正义基因表达载体P1301-Nt FT2;中国水仙愈伤组织与0.5 mol/L甘露醇共培养6 h后,置于1.0 OD600的农杆菌重悬液中侵染20 min,在25℃、黑暗条件下,共培养6天,其GUS瞬时表达率达到64.28%。构建了中国水仙Nt FT2正义基因表达载体,建立了高效的中国水仙愈伤组织遗传转化体系。
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关 键 词: | 中国水仙;NtFT2 基因;愈伤组织;遗传转化 |
收稿时间: | 2015-10-23 |
修稿时间: | 2016-03-17 |
Construction of Expression Vector with NtFT2 Sense Gene and Establishment of Transgenic Procedure from Callus in Narcissus tazetta var. chinensis |
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Abstract: | |
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Keywords: | Narcissus tazetta var. chinensis NtFT2 gene callus genetic transformation |
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