鱼腥藻PCC 7120 基因alr0267敲除及其功能的初步研究 |
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引用本文: | 曹必溥,傅雪琳,蔡晓丹,等.鱼腥藻PCC 7120 基因alr0267敲除及其功能的初步研究[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2016,44(6):157-166. |
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作者姓名: | 曹必溥 傅雪琳 蔡晓丹 等 |
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作者单位: | 华南农业大学 生命科学学院 广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室,华南农业大学 农学院,华南农业大学 生命科学学院 广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室 |
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基金项目: | 广东省自然科学基金项目(S2013010013184);公益性行业(农业)科研专项(201003021);国家自然科学基金项目(50977041) |
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摘 要: | 【目的】敲除鱼腥藻PCC 7120的alr0267基因,并对其功能进行初步研究。【方法】克隆获得鱼腥藻PCC 7120 alr0267基因部分片段,通过构建敲除载体,使其与目的基因发生单交换同源重组,从而将鱼腥藻PCC 7120中的alr0267基因敲除,并对敲除体进行纯化和PCR鉴定,然后对alr0267敲除体和野生型固氮异形胞进行形态观察和统计,同时采用实时荧光定量PCR,在培养不同时间(0,3,8,24h和10d)检测野生型和alr0267基因敲除体中与异形胞功能相关基因all0813、all2736、alr2887的相对表达量。【结果】鱼腥藻PCC 7120 alr0267基因被成功敲除;在缺氮条件下培养6~12d,敲除体异形胞营养细胞数的均值明显少于野生型;实时定量PCR分析表明,野生型中all0813、all2736、alr2887基因表达量均在培养24h达到最大,敲除体中这3个基因最大相对表达量的出现时间均有所延迟。【结论】alr0267基因敲除导致异形胞分化频率增加,同时影响异形胞的正常发育。
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关 键 词: | 鱼腥藻PCC 7120 alr0267基因 异形胞 单交换同源重组 实时荧光定量PCR |
收稿时间: | 2014/10/24 0:00:00 |
Inactivation and functions of gene alr0267 in cyanobacterium Anabaena sp.PCC 7120 |
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Abstract: | |
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Keywords: | Anabaena sp PCC 7120 alr0267 gene heterocyst single-crossover homologus integration real-time PCR |
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