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乳腺特异性共表达4种脂肪酸合成酶载体 及其稳转山羊成纤维细胞系的构建
引用本文:潘开源,陈建文,陈真,张明翔,石恒波,孙秀柱,章孝荣,张运海. 乳腺特异性共表达4种脂肪酸合成酶载体 及其稳转山羊成纤维细胞系的构建[J]. 安徽农业大学学报, 2015, 42(3): 417-423. DOI: 10.13610/j.cnki.1672-352x.20150424.014
作者姓名:潘开源  陈建文  陈真  张明翔  石恒波  孙秀柱  章孝荣  张运海
作者单位:安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室,安徽农业大学动物科技学院,合肥230036;安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室,安徽农业大学动物科技学院,合肥230036;安徽省羊繁育工程中心,合肥230036;西北农林科技大学动物科技学院,杨凌,712100
基金项目:高效转基因羊制备技术体系建立项目(2011ZX08008-00)资助
摘    要:为改善山羊乳品质,创制乳汁中富含n-3不饱和脂肪酸的奶山羊育种新材料,首先构建了一种山羊乳腺特异性表达载体,以实现n-3不饱和脂肪酸合通路中4种脂肪酸合成酶基因(fat-1,fads2,elovl5和scd-1)的共表达。为初步验证该载体的有效性,通过脂质体法转染小鼠乳腺上皮细胞系C127,经G418筛选收集阳性C127转基因细胞,并对其进行反转录PCR(RT-PCR)检测。结果表明,4种基因均可在C127细胞转基因中表达。将该多基因共表达载体转染奶山羊成纤维细胞,通过G418筛选获得了稳定转染的细胞系。PCR结果显示,4个目的基因均成功整合到奶山羊成纤维细胞基因组中。总之,本研究成功构建了乳腺特异性共表达4种脂肪酸合成酶转基因载体及其山羊转基因细胞系,为创制乳腺特异性表达多不饱和脂肪酸的转基因奶山羊奠定了基础。

关 键 词:山羊  乳品质  n-3多不饱和脂肪酸  多基因共表达载体

Construction of mammary gland specific transgene vector harboring four fat acid synthetase genes and establishment of transgenic fibroblast cell lines in goat
PAN Kaiyuan,CHEN Jianwen,CHEN Zhen,ZHANG Mingxiang,SHI Hengbo,SUN Xiuzhu,ZHANG Xiaorong and ZHANG Yunhai. Construction of mammary gland specific transgene vector harboring four fat acid synthetase genes and establishment of transgenic fibroblast cell lines in goat[J]. Journal of Anhui Agricultural University, 2015, 42(3): 417-423. DOI: 10.13610/j.cnki.1672-352x.20150424.014
Authors:PAN Kaiyuan  CHEN Jianwen  CHEN Zhen  ZHANG Mingxiang  SHI Hengbo  SUN Xiuzhu  ZHANG Xiaorong  ZHANG Yunhai
Affiliation:PAN Kaiyuan;CHEN Jianwen;CHEN Zhen;ZHANG Mingxiang;SHI Hengbo;SUN Xiuzhu;ZHANG Xiaorong;ZHANG Yunhai;Anhui Provincial Lab for Livestock and Poultry Genetic Resource Conservation and Bio-Breeding, School of Animal Science and Technology, Anhui Agricultural University;Engineering Research Center of Reproduction and Breeding in Sheep of Anhui Province;College of Animal Science and Technology, Northwest Agriculture & Forestry University;
Abstract:
Keywords:goat  milk quality  n-3 polyunsaturated fatty acids  polyciston transgene construct
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