| 不同提取方法对检测单头白背飞虱携带SRBSDV灵敏度的影响 |
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| 引用本文： | 崔丽贤,李战彪,谢慧婷,秦碧霞,蔡健和.不同提取方法对检测单头白背飞虱携带SRBSDV灵敏度的影响[J].贵州农业科学,2019,47(10). |
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| 作者姓名： | 崔丽贤 李战彪 谢慧婷 秦碧霞 蔡健和 |
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| 作者单位： | 广西农业科学院植物保护研究所/广西作物病虫害生物学重点实验室,广西南宁,530007;广西农业科学院植物保护研究所/广西作物病虫害生物学重点实验室,广西南宁,530007;广西农业科学院植物保护研究所/广西作物病虫害生物学重点实验室,广西南宁,530007;广西农业科学院植物保护研究所/广西作物病虫害生物学重点实验室,广西南宁,530007;广西农业科学院植物保护研究所/广西作物病虫害生物学重点实验室,广西南宁,530007 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目;广西农业科学院基本科研业务专项项目;广西水稻遗传育种重点实验室项目;广西作物病虫害生物学重点实验室项目 |
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| 摘 要： | 为找到较好的白背飞虱RNA提取方法用于大规模带毒率检测、SRBSDV的早期监测及科学防控提供参考,采用Trizol试剂盒法、改良Trizol法、改良CTAB-LiCl法、改良异硫氰酸胍法和NaOH粗提法5种方法提取单头白背飞虱的总RNA,进行检测比较其提取速率和稳定性。结果表明:采用Trizol试剂盒法、改良Trizol法、改良CTAB-LiCl法、改良异硫氰酸胍法和NaOH粗提法5种方法提取单头白背飞虱的总RNA浓度分别为113.08ng/μL、222.43ng/μL、57.68ng/μL、102.16ng/μL和31.06ng/μL,改良Trizol法和改良CTAB-LiCl法提取的RNA纯度较高。5种方法提取的RNA均能用于SRBSDV的检测,其中改良Trizol法RT-PCR扩增的灵敏度最高,稀释梯度为10-4,NaOH粗提法灵敏度最差,稀释梯度仅为10-1,其余3种均能达到10-3。改良Trizol法提取的虫体RNA较完整且扩增效果稳定,但试剂价格较昂贵,不适合做大量样品提取;NaOH粗提法的灵敏度虽相对较低,但由于操作简便,经济快速,更适合用于大量样品的检测。
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| 关 键 词： | 白背飞虱 总RNA 南方水稻黑条矮缩病毒 RT-PCR灵敏度 |
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