种间杂交选育新型产脂蛹虫草

为选育能够合成虫草素又能高效积累油脂的新型蛹虫草菌株,将高产虫草素的蛹虫草FY1421及高效合成油脂特别是不饱和脂肪酸的深黄被孢霉菌株Z0108进行原生质体融合。对亲本的原生质体的形成与再生、双亲灭活及融合的条件进行了筛选与优化,并结合96微孔板初筛和摇瓶发酵复筛,获取融合子。结果表明:蛹虫草菌株FY1421采用1. 5%溶壁酶+0. 5%蜗牛酶+0. 5%纤维素酶的混合酶液处理120 min,原生质体数量最多,再生率最高;深黄被孢霉菌株Z0108采用1%溶壁酶+1%蜗牛酶+1%纤维素酶的混合酶液处理4 h,原生质体数量最多,再生率最高; FY1421原生质体采用60℃水浴热灭活10 min,Z0108原生质体采用紫外线灭活30 s,均可达到100%的灭活率;灭活双亲在35℃下,使用40%的PEG促融10 min,融合效率最高。从650株融合子筛选得到融合菌株RCS262,其摇瓶发酵虫草素含量达5 926μg·g~(-1),油脂含量达到37. 5%。采用原生质体融合技术进行蛹虫草与深黄被孢霉的种间杂交,成功获得融合菌株既能高产虫草素,也具有高效积累油脂的能力。