转基因甘蔗红糖DNA的提取及分子鉴定 |
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作者姓名: | 王文治 杨本鹏 冯小艳 王俊刚 冯翠莲 熊国如 赵婷婷 沈林波 张树珍 许莉萍 |
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作者单位: | 中国热带农业科学院甘蔗研究中心,中国热带农业科学院热带生物技术研究所,农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室,海口,571101;福建农林大学,国家甘蔗工程技术研究中心,农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室,福州,350002 |
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基金项目: | 国家甘蔗工程技术研究中心开放课题;国家自然科学基金 |
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摘 要: | 随着不同转基因生物(GMO)制品的不断商业化,转基因成分检测技术也需不断更新。由于甘蔗红糖为甘蔗汁经高温熬煮浓缩而成,红糖中残留的DNA降解严重、含量低、片段短,且蛋白及糖分杂质含量高,所以甘蔗红糖DNA是比较难以收集并进行分子检测的。为了在转基因甘蔗红糖商业化前建立起转基因甘蔗红糖DNA的提取及分子鉴定技术,本研究以转基因甘蔗和非转基因甘蔗为材料,模仿传统的红糖制作工艺,分别获得了转基因甘蔗红糖与非转基因甘蔗红糖。通过对DNA提取方法进行改进,设计不同扩增片段长度的引物,并对传统PCR与荧光定量PCR进行比较,建立了稳定的甘蔗红糖DNA的提取方法及外源基因分子鉴定技术该技术对转基因甘蔗红糖与非转基因甘蔗红糖进行准确鉴别,为今后转基因甘蔗红糖的商业化所需的转基因食品鉴定提供技术支持,也为后面更为重要的转基因甘蔗白糖DNA的提取及分子鉴定提供借鉴。
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关 键 词: | 甘蔗红糖 转基因生物 外源基因 分子鉴定 荧光定量PCR |
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