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鸭源呼肠孤病毒DRV-GZ株S2基因的序列分析及其表达
引用本文:刘红,郁宏伟,朱朝辉,吴志新,李苏芝,廖明.鸭源呼肠孤病毒DRV-GZ株S2基因的序列分析及其表达[J].中国兽医科技,2008,38(3):224-228.
作者姓名:刘红  郁宏伟  朱朝辉  吴志新  李苏芝  廖明
作者单位:华南农业大学兽医学院,广东广州510642
基金项目:广东省科技计划项目(2006A20301001);教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-06-0752);广东省动物防疫检疫专项(粤农[2006]264号)
摘    要:采用RT-PCR方法从鸭源呼肠孤病毒DRV—GZ株中扩增出了S2基因片段,将其克隆到表达载体pET-28a(+)中,测序验证后转化入表达宿主菌Rosetta^TM2(DE3)plysS,进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达出相对分子质量约为50000的重组融合蛋白,在浓度为0.6mmol/L的IPTG诱导4h的情况下表达效果最好。表达的蛋白以包涵体的形式存在于菌体中。表达产物经Ni柱纯化后可得到纯度较高的目的蛋白。经Western-blot分析,所纯化的蛋白能与抗呼肠孤病毒DRV—GZ株阳性血清进行特异性的免疫印迹反应,证实表达的蛋白具有较好的反应原性。

关 键 词:鸭源呼肠孤病毒  S2基因  克隆  原核表达  纯化  免疫印迹
文章编号:1673-4696(2008)03-0224-05
收稿时间:2007-10-08
修稿时间:2007-12-24

Sequence analysis and expression of S2 gene of reovirus strain DRV-GZ originated from duck
LIU Hong, YU Hong-wei, ZHU Chao-hui, WU Zhi-xin, LI Su-zhi, LIAO Ming.Sequence analysis and expression of S2 gene of reovirus strain DRV-GZ originated from duck[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2008,38(3):224-228.
Authors:LIU Hong  YU Hong-wei  ZHU Chao-hui  WU Zhi-xin  LI Su-zhi  LIAO Ming
Abstract:
Keywords:reovirus-originated duck  S2 gene  cloning  prokaryotic expression  purification  Western-blot
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