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猪IκBα基因定点突变中两种方法的应用
作者姓名:李和刚  傅田  靳二辉  操继跃  李奎  肖邦  杨述林
作者单位:1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,中国农业科学院家养动物遗传资源与种质创新重点开放实验室, 北京 100193; 2.华中农业大学动物医学院, 武汉 430070
基金项目:国家自然科学基金,国家重点基础研究发展规划(973计划),国家高技术研究发展计划(863计划) 
摘    要:作者将猪IκBα基因32、36位丝氨酸位点突变为丙氨酸,为进一步研究突变型IκBα蛋白对异种移植延缓性排斥反应的抑制机理奠定基础。首先采用Stratagene公司单点突变试剂盒将猪IκBα基因32位丝氨酸位点突变为丙氨酸,接着试图在36位引入突变但未成功,最后改用重叠延伸PCR对36位进行突变。结果表明,两种突变方法结合使用,成功地将猪IκBα基因32、36位丝氨酸位点突变为丙氨酸。说明两种突变方法各有所长,又有各自的缺点,应根据试验的实际需要灵活选择合适的突变方法,以收到事半功倍的效果。

关 键 词:定点突变  重叠延伸PCR  猪IκBα基因  
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