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DOI
责任编辑
分类号
杂志ISSN号
猪IκBα基因定点突变中两种方法的应用
作者姓名:
李和刚
傅田
靳二辉
操继跃
李奎
肖邦
杨述林
作者单位:
1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,中国农业科学院家养动物遗传资源与种质创新重点开放实验室, 北京 100193; 2.华中农业大学动物医学院, 武汉 430070
基金项目:
国家自然科学基金,国家重点基础研究发展规划(973计划),国家高技术研究发展计划(863计划)
摘 要:
作者将猪IκBα基因32、36位丝氨酸位点突变为丙氨酸,为进一步研究突变型IκBα蛋白对异种移植延缓性排斥反应的抑制机理奠定基础。首先采用Stratagene公司单点突变试剂盒将猪IκBα基因32位丝氨酸位点突变为丙氨酸,接着试图在36位引入突变但未成功,最后改用重叠延伸PCR对36位进行突变。结果表明,两种突变方法结合使用,成功地将猪IκBα基因32、36位丝氨酸位点突变为丙氨酸。说明两种突变方法各有所长,又有各自的缺点,应根据试验的实际需要灵活选择合适的突变方法,以收到事半功倍的效果。
关 键 词:
定点突变
重叠延伸PCR
猪IκBα基因
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