复合RT-PCR检测猪乙脑病毒和猪流感病毒方法的建立 |
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引用本文: | 吕晓丽,崔保安,陈红英,魏战勇,王东方,郭小参.复合RT-PCR检测猪乙脑病毒和猪流感病毒方法的建立[J].华南农业大学学报,2008,29(4). |
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作者姓名: | 吕晓丽 崔保安 陈红英 魏战勇 王东方 郭小参 |
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作者单位: | 1. 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002;河南省动物性食品安全重点实验室,河南,郑州,450002 2. 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002 |
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基金项目: | 国家食品安全重大攻关专项项目,河南省科技攻关项目 |
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摘 要: | 根据GenBank上已发表的猪乙脑病毒(JEV)的E基因序列和猪流感病毒(SIV)的NP基因序列,设计合成了2对特异引物,分别建立了JEV和SIV的单项RT-PCR诊断方法,通过对扩增条件的筛选,最终成功地建立了JEV和SIV的复合RT-PCR诊断方法,利用一次RT-PCR反应,即可同时扩增JEV的349 bp和SIV 155 bp的特异性片段,而猪瘟病毒(HCV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、正常细胞(PK-15)核酸扩增结果为阴性,对JEV和SIV的最低检出量分别为100和10 pg的cDNA. 该方法适合对JEV和SIV的联合检测和鉴别诊断.
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关 键 词: | 复合RT-PCR 检测 猪乙脑病毒 猪流感病毒 |
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