辣椒CaWRKY30转录因子的克隆、亚细胞定位及番茄斑萎病毒侵染下的表达分析 |
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作者姓名: | 贾志强 许云玉 高雪 陶宏征 陈增敏 刘雅婷 李永忠 |
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作者单位: | 云南农业大学 植物保护学院,云南 昆明 650201;云南农业大学 农学与生物技术学院,云南 昆明 650201;云南农业大学 植物保护学院,云南 昆明 650201;红河学院 生命科学与技术学院,云南 蒙自 661199;云南农业大学 烟草学院,云南 昆明 650201 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31471828;31260451); |
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摘 要: | 为研究辣椒CaWRKY30转录因子与番茄斑萎病毒互作的响应机制,以辣椒湘研11为试验材料,通过RNA提取、RT-PCR、切胶纯化及克隆等试验获得CaWRKY30编码序列。生物信息学分析结果表明,CaWRKY30全长1 122 bp,编码373个氨基酸,该基因编码的蛋白含有1个WRKY保守结构域和1个C2H2结构域,属于典型的Ⅱ(e)亚家族成员。系统发育分析表明,与马铃薯StWRKY22氨基酸序列的亲缘关系最近。本氏烟叶片亚细胞定位试验发现,CaWRKY30在本氏烟幼苗中定位于细胞核和细胞膜,并且导致细胞膜加厚。实时荧光定量PCR分析结果表明,观察番茄斑萎病毒机械摩擦接种辣椒后的病毒积累量,发现病毒积累量在接种1~14 d逐渐上升,在接种后14 d处于最大值,接种14 d后病毒积累量逐渐下降;同时,CaWRKY30受番茄斑萎病毒接种后诱导,在接种病毒1~14 d CaWRKY30表达量上调,14 d达到峰值,14 d以后表达量逐渐下降。综上,获得了CaWKRY30转录因子基因序列,该转录因子定位于细胞核和细胞膜,并初步阐述了辣椒CaWRKY30...
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关 键 词: | 辣椒 CaWRKY30基因克隆 生物信息学 番茄斑萎病毒 表达分析 |
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