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黄瓜根系蛋白质组分析的双向电泳技术条件优化
引用本文:王珊珊,郝宇涵,任婧祺,郭春深,朱延殊,范海延.黄瓜根系蛋白质组分析的双向电泳技术条件优化[J].沈阳农业大学学报,2012,43(2):233-236.
作者姓名:王珊珊  郝宇涵  任婧祺  郭春深  朱延殊  范海延
作者单位:1. 沈阳农业大学生物科学技术学院,沈阳,110161
2. 沈阳农业大学生物科学技术学院,沈阳110161;沈阳农业大学设施园艺省部共建教育部重点实验室,沈阳110161
基金项目:国家自然科学基金项目,沈阳市科学技术基金项目
摘    要:双向电泳(2-DE)是蛋白质组学研究的重要支撑技术之一。为建立适于黄瓜根系蛋白质组分析的双向电泳技术,对黄瓜根系蛋白质样品提取方法、裂解缓冲液配方及SDS-PAGE分离胶浓度等参数进行研究。结果表明:采用TCA/丙酮法提取黄瓜根系中的蛋白质,裂解缓冲液为8mol·L-1尿素、2mol·L-1硫脲、2%IPG Buffer、4%CHAPS、1%TBP、65mmol·L-1DTT、2mmol·L-1EDTA、0.001%溴酚蓝和1%鸡尾酒,SDS-PAGE分离胶浓度为11%时,可获得分离效果较好的双向电泳图谱。该技术条件为适合黄瓜根系蛋白分离的较优双向电泳体系。

关 键 词:黄瓜根系  蛋白质组  双向电泳

Optimization of Two-dimensional Electrophoresis for Proteome of Cucumber Root
WANG Shan-shan , HAO Yu-han , REN Jing-qi , GUO Chun-shen , ZHUN Yan-shu , FAN Hai-yan.Optimization of Two-dimensional Electrophoresis for Proteome of Cucumber Root[J].Journal of Shenyang Agricultural University,2012,43(2):233-236.
Authors:WANG Shan-shan  HAO Yu-han  REN Jing-qi  GUO Chun-shen  ZHUN Yan-shu  FAN Hai-yan
Institution:a,b (a.College of Bioscience and Biotechnology,b.Key Laboratory of Protected Horticulture Ministry of Education,Shenyang Agricultural University,Shenyang 110161,China)
Abstract:Two-dimensional electrophoresis(2-DE) is known as the most effective as well as one of the simplest methods for separating proteins.To obtain suitable 2-DE protocol for cucumber root,the method of protein extraction,reagent of lysis buffer and concentration of the second-dimensional SDS separation gel were optimized.Results showed TCA/acetone protein extraction method,8mol·L-1 Urea,2mol·L-1 Thiourea,2% IPG buffer,4% CHAPS,1% TBP,65mmol·L-1 DTT,2mmol·L-1 EDTA,0.001% Bromophenol blue and 1% Cock tail lysis buffer and 11% gel concentration were appropriate for the sample preparation of cucumber root.
Keywords:cucumber root  proteomics  2D-electrophoresis
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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