金黄色葡萄球菌聚集因子A(C1fa A)功能区基因的克隆及真核表达质粒构建 |
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作者姓名: | 魏春梅 杨宏军 彭广能 何洪斌 王长法 高运东 仲跻峰 |
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作者单位: | [1]山东省农科院奶牛研究中心,山东济南250100 [2]四川农业大学动物医学院,四川雅安625014 |
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基金项目: | 山东省中青年科学家基金(BS2009NY002);山东省农业重大应用技术创新课题(2009);现代农业产业体系(nycytx-0107) |
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摘 要: | 粘附素蛋白是金黄色葡萄球菌感染早期最重要的致病因子,研究根据金黄色葡萄球菌聚集因子A(c1fa A)基因,设计合成特异性引物,以国内奶牛乳腺炎临床分离株金黄色葡萄球菌基因组为PCR模板,进行c1fa A基因的克隆,并连接入pMD18-T载体进行测序和序列分析,然后经BamH I和Xba I双酶切后构建真核表达载体并进行鉴定。结果表明,以金黄色葡萄球菌标准株为对照,国内分离株多数在990bp处扩增到特异性条带,经测序鉴定,与Genebank发表的金黄色葡萄球菌c1fa A序列同源性为99%;构建的真核表达质粒通过PCR和双酶切鉴定证明构建成功,为研究核酸疫苗奠定基础。
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关 键 词: | 乳腺炎 金黄色葡萄球菌 聚集因子A |
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