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金线莲ISSR-PCR反应体系建立
引用本文:唐军荣,谭辛夷,孙正海,辛培尧.金线莲ISSR-PCR反应体系建立[J].北方园艺,2014(18).
作者姓名:唐军荣  谭辛夷  孙正海  辛培尧
作者单位:西南林业大学国家林业局西南地区生物多样性保育重点实验室,云南昆明,650224;西南林业大学园林学院,云南昆明,650224
基金项目:云南省教育厅科学研究基金资助项目(2013Y123)
摘    要:利用正交设计L16(45)对金线莲ISSR-PCR反应体系的5因素(模板DNA、Taq酶、引物、Mg2+和dNTP)在4个水平上进行优化试验,采用直观分析法获得影响因素最佳反应水平。结果表明:最终建立的金线莲ISSR-PCR的最佳反应体系为,在25μL的反应体系中,DNA模板为40ng、Taq酶为1.60U、引物浓度为0.80mmol/L、dNTP浓度为0.96mmol/L、Mg2+浓度为2.40mmol/L。该反应体系的建立为金线莲种质资源分类、遗传多样性分析提供了更客观可靠的方法。

关 键 词:金线莲  ISSR-PCR  正交设计
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