| 摘 要： | 为研制对不同血清型具有交叉保护作用的副猪嗜血杆菌(HPS)重组抗原蛋白,本研究将390只6周龄雌性昆明鼠随机分为13组,每组30只,分别为HPS血清型5型单个重组蛋白免疫组:外膜蛋白(D15)组、分泌蛋白(afuA)组、转铁结合蛋白(tbpB)组、细胞致死膨胀毒素(cdtC)组、PBS组,联合重组蛋白免疫组:HPS血清型4+5+13型D15、HPS血清型5型D15+tbpB、D15+cdtC、cdtC+tbpB、D15+afuA、D15+cdtC+tbpB、D15+afuA+tbpB及PBS组。每间隔2周经皮下注射免疫2次各组相应乳化蛋白,于一免后2周、二免后2周采集各组小鼠尾静脉血,利用间接ELISA检测小鼠血清抗体效价,并通过免疫鼠脾淋巴细胞增殖试验、细胞因子检测、血清杀菌试验及攻毒保护试验评价重组蛋白的免疫效果。结果显示,免疫组小鼠均能产生显著的T淋巴细胞增殖反应,其产生的血清抗体均能极显著抑制HPS生长(p0.001),且抗体水平均极显著高于对照组(p0.001);联合重组蛋白免疫组小鼠产生的IgG抗体水平、细胞因子IL-2、IL-4和IFN-γ的水平均略高于单个重组蛋白免疫组;其中,HPS血清型5型D15+afuA和血清型4+5+13型D15免疫组小鼠产生的IgG抗体水平略高于其余联合重组蛋白免疫组,各联合免疫组间细胞因子水平差异不显著;HPS血清型5型D15+afuA+tbpB和血清型4+5+13型D15对4型HPS感染的保护率均为71%,对5型菌株的保护率均为86%,对13型菌株的保护率为71%和86%,表明血清型5型D15+afuA+tbpB重组蛋白组合和血清型4+5+13型D15重组蛋白组合对HPS感染具有交叉保护的潜力。本研究为HPS亚单位疫苗的研制提供了实验依据。
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