| EV71病毒3C蛋白真核表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 张华,李兴志,张雅婷,邹德华,郑亮,程丽鑫,沈玉江,曹宏伟.EV71病毒3C蛋白真核表达载体的构建及表达[J].安徽农业科学,2018,46(8):97-99. |
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| 作者姓名： | 张华 李兴志 张雅婷 邹德华 郑亮 程丽鑫 沈玉江 曹宏伟 |
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| 作者单位： | 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学生物技术中心,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学生物技术中心,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学生物技术中心,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学生物技术中心,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学生物技术中心,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学生物技术中心,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学生物技术中心,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学生物技术中心,黑龙江大庆163319 |
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| 基金项目： | 黑龙江省教育厅科学技术研究面上项目 |
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| 摘 要： | 目的]构建EV71病毒3C蛋白的真核表达载体,并验证其在细胞中的正确表达。方法]采用RT-PCR技术,从EV71病毒基因组RNA中扩增3C基因,克隆到真核表达载体pc DNA3.0-Flag上,并转染He La细胞,通过Western blot和免疫荧光验证3C蛋白的表达。结果]酶切及测序鉴定显示,EV71病毒3C真核表达载体构建成功。Western blot和免疫荧光结果证实3C蛋白在He La细胞中成功表达。结论]该研究成功构建了真核表达载体pc DNA3.0-Flag-3C,为进一步研究EV71病毒3C蛋白生物学功能奠定了一定基础。
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| 关 键 词： | EV71病毒 3C蛋白 基因克隆 载体构建 蛋白表达 |
Construction of pcDNA3.0-Flag-3C Plasmid and Its Expression of EV71 3C Protein in HeLa Cells |
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| Abstract: | Objective]To construct the eukaryotic expression vector of EV71 3C protein and investigate its expression in HeLa cells.Method] Fragment of 3C was amplified from total RNA of EV71 genome and cloned into eukaryotic expression vector pcDNA3.0-Flag.After the recombi-nation vector was transfected into HeLa cells,Western blot and indirect immunofluorescent assay were performed to confirm the 3C protein expres-sion.Result]Enzyme digestion and sequencing analysis showed that eukaryotic expression vector pcDNA3.0-Flag-3C was constructed cor-rectly.The results of Western blot and indirect immunofluorescent indicated 3C protein was expressed in HeLa cells.Conclusion]This research successfully constructed eukaryotic expression vector pcDNA3.0-Flag-3C,which might provide the foundation of research about the biological function of EV71 3C protein. |
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