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传染性造血器官坏死病病毒G基因全长cDNA克隆及重组表达研究
作者单位:;1.吉林农业大学动物科学技术学院;2.内蒙古乌兰察布市农牧业综合行政执法支队;3.内蒙古乌兰察布市水产站;4.吉林省卫生检测检验中心
摘    要:本研究旨在克隆G基因全长并与其他传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)株进行分析,为IHNV的预防检测提供依据。通过提取IHNV-G蛋白RNA并进行扩增,将其克隆到p MD-18T并与p Chlamy-4载体相连,重组到莱茵衣藻中并提取总蛋白,结果可得:扩增片段长度为1 500 bp,经SDS-PAGE电泳得到一条大约为58 k Da的蛋白条带,Westen Blot分析结果显示,重组莱茵衣藻所表达的蛋白可以与6×HIS标签抗体特异性结合;并且以重组表达的G蛋白为抗原,鼠抗IHNV血清为一抗,辣根过氧化物酶标记的驴抗鼠IgG为二抗,再次进行Westen Blot检验,其结果显示,经诱导后的G蛋白能与鼠抗IHNV血清反应,并在58 k Da处出现了一条明显的特异性条带,具有良好的反应原性。表明重组莱茵衣藻表达系统构建成功。

关 键 词:传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)  糖蛋白  Western  Blot

Cloning and recombinant expression of cDNA gene of infectious hematopoietic necrosis virus G gene
Abstract:
Keywords:
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