乙肝表面抗原与促黄体激素释放激素的融合基因5''''端改造及其在大肠杆菌中的表达 |
| |
作者姓名: | 凌雯 龚晓明 杨震 杜念兴 |
| |
作者单位: | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 |
| |
摘 要: | 应用聚合酶链反应(PCR)对畜型和禽型两个融合基因HBsAg/LHRH的5′端分别作了改造,切去了融合基因起始密码ATG前一段非编码序列61个碱基,将改造后的融合基因插入pBluescripe11KS+质粒中。琼脂糖凝胶电泳以及序列分析均表明改造和克隆成功。将改造后的融合基因克隆到含T7Promoter强启动子的表达载体pET15b中,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,在E.coliDE3中表达,表达量占菌体总蛋白的10%,以兔抗LHRH抗体进行Western-blot检测,出现阳性反应带。用抗HBsAg抗体作ELISA检测,结果稀释1×10-6时仍为阳性反应。
|
关 键 词: | 融合基因HBsAg/LHRH;聚合酶链反应;基因改造;原核表达 |
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |