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牛细小病毒病毒样颗粒的组装及其免疫原性评价
引用本文:张越,常继涛,于力. 牛细小病毒病毒样颗粒的组装及其免疫原性评价[J]. 中国预防兽医学报, 2014, 36(12)
作者姓名:张越  常继涛  于力
作者单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/牛羊传染病研究创新团队,黑龙江哈尔滨,150001
摘    要:为研究牛细小病毒(BPV)VP2衣壳蛋白自组装病毒样颗粒(VLPs)以及VLPs的免疫原性.本研究以BPV-1型C7-5中国分离株的基因组序列为模板扩增VP2蛋白的编码基因,将其克隆至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,利用E.coliB J5183内同源重组将VP2基因插入腺病毒骨架质粒pAdEasy-1中,获得携带BPVVP2基因的重组腺病毒质粒(pAd-BPV-VP2).该重组质粒经Pac Ⅰ线性化后转染Ad293细胞,获得重组腺病毒rAd-BPV-VP2,第8代时滴度为107.25 TCID50/mL.间接免疫荧光、westemblot以及电镜观察结果显示,BPV VP2蛋白可以在腺病毒系统中稳定表达,并有效组装VLPs.将rAd-BPV-VP2肌肉注射免疫BALB/c小鼠,结果显示,针对BPV的血清IgG和中和(VN)抗体分别于加强免疫后2周和8周达最高水平,高峰抗体可持续至15周,VN抗体的最高滴度可达1:4 000.此外,与对照小鼠血清相比,免疫小鼠血清中的IL-2、IL-4及IFN-γ含量显著升高(p<0.05).结果表明,rAd-BPV-VP2免疫小鼠后可以诱导机体产生针对BPV的特异性体液和细胞免疫.本研究为BPV的免疫预防及载体的开发奠定了基础.

关 键 词:牛细小病毒  病毒样颗粒  免疫原性

Assembly and immunogenicity of bovine parvovirus virus-like particles
ZHANG Yue,CHANG Ji-tao,YU Li. Assembly and immunogenicity of bovine parvovirus virus-like particles[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2014, 36(12)
Authors:ZHANG Yue  CHANG Ji-tao  YU Li
Abstract:
Keywords:bovine parvovirus  virus-like particles  immunogenicity
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