| H7和N9亚型及A型流感病毒多重荧光定量RT-RCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 徐晓龙,包红梅,马勇,施建忠,曾显营,李雁冰,王秀荣,陈化兰.H7和N9亚型及A型流感病毒多重荧光定量RT-RCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2014,36(12). |
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| 作者姓名： | 徐晓龙 包红梅 马勇 施建忠 曾显营 李雁冰 王秀荣 陈化兰 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 十二五农村领域国家科技课题，国际合作项目 |
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| 摘 要： | 为同时检测H7亚型、N9亚型和A型流感病毒,本研究根据流感病毒H7 HA、N9 NA以及M基因序列分别合成3对引物和3种荧光素标记的探针,建立了多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法.特异性试验结果显示,仅H7亚型和N9亚型病毒分别在FAM和JOE通道监测到荧光信号,而所有A型参考流感病毒株均可获得Cy5荧光信号,此外其他相关的禽源病毒检测结果均为阴性.同时,以H7N9亚型病毒RNA为模板建立了标准曲线,检测H7 HA、N9 NA以及M基因的R2值均为0.999,最低检出量均为35.4 EID50/mL.批内和批间试验的变异系数均小于1.48％.利用该方法对1 072份临床样品(咽喉和泄殖腔拭子)检测,H7N9亚型和A型流感病毒分别检出7份和23份.该方法可以有助于H7N9亚型和A型流感病毒的快速检测及鉴定.
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| 关 键 词： | A型流感病毒 H7N9亚型流感病毒 多重TaqMan荧光定量RT-PCR |
Establishment of multiplex real-time RT-PCR for detecting H7, N9 subtype and A type influenza virus |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | A type influenza virus H7N9 subtype influenza virus multiplex TaqMan real-time RT-PCR |
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