摘 要: | 旨在探索CRISPR/Cas9技术的新应用,本研究通过在小鼠遗传操作(Genetic manipulation)中使用该技术,创建了一种在活体组织内研究基因功能的方法。通过胚胎电转、免疫组化和PCR分析等手段,结果发现,针对DCX基因进行编辑,再现了DCX下调导致神经元迁移障碍的表型,说明该技术能够用于小鼠遗传操作中下调基因表达;其次,该技术还成功应用于Pcdhα基因簇的编辑并研究了基因簇恒定区的功能;最后,通过基因型鉴定发现,胚胎电转中使用CRISPR/Cas9会导致目的基因的敲除、反转和重复事件的发生。综上所述,在小鼠胚胎电转中使用CRISPR/Cas9技术,能够成功编辑目的基因,从而实现活体组织内研究基因的在体功能。
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