辣椒的一种适用于大规模PCR鉴定的DNA快速提取技术 |
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引用本文: | 李委,戴祖云,杨中周,夏伟伟.辣椒的一种适用于大规模PCR鉴定的DNA快速提取技术[J].中国农学通报,2018,34(4):43-48. |
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作者姓名: | 李委 戴祖云 杨中周 夏伟伟 |
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作者单位: | 合肥学院,安徽江淮园艺种业股份有限公司,安徽江淮园艺种业股份有限公司,安徽江淮园艺种业股份有限公司 |
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基金项目: | 2016年安徽省援藏援疆援青计划项目《“嘎玉”辣椒系列新品种及高效栽培技术的示范与推广》(项目编号:1604e0302003) |
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摘 要: | 传统的辣椒DNA提取常采用CTAB法,该技术已难满足大量开展分子生物学工作的需要,为了解决此困境,进行了辣椒上碱煮法提取的尝试。一个可用于新品种的SSR分子标记被用作检验手段,验证碱煮法所提DNA是否可满足实验需要。结果表明针对不同的研究目的需采取不同的组织部位来进行DNA的提取,当面临种子纯度测定的任务时,需要截取种子的芽根。当面临成熟植株的基因型筛选的任务时,需要截取植株的顶端嫩叶。以上这些植物材料置PCR管中,在向管中加入80 μL 0.2 mol/L NaOH溶液后,置PCR仪上以100℃处理30分钟,
再以40 μL Tris-HCl缓冲液将pH值调节至7~8之间后,以之为模板可在后续的SSR-PCR中得到良好的实验结果。综上,本研究表明相较其他耗时耗力的传统DNA提取方法,碱煮法确是更适合解决辣椒大规模鉴定问题的技术手段。
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关 键 词: | 辣椒 纯度 基因型鉴定 DNA提取 |
收稿时间: | 2017/1/11 0:00:00 |
修稿时间: | 2017/3/16 0:00:00 |
A DNA Rapid Extraction Method of Pepper: Suitable for High Throughput PCR Identification |
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Abstract: | |
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Keywords: | Pepper Seed purity Genetic Identification DNA extraction |
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