锌指核酸酶技术在基因组定点修饰中的应用 |
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作者姓名: | 张庆晓 曹少先 苏磊 王慧利 孟春花 王锋 |
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作者单位: | 1. 江苏省农业科学院畜牧研究所,江苏南京210014;南京农业大学动物科技学院,江苏南京210095 2. 江苏省农业科学院畜牧研究所,江苏南京,210014 3. 南京农业大学动物科技学院,江苏南京,210095 |
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基金项目: | 转基因生物新品种培育科技重大专项(2009ZX08010-019B);国家自然科学基金项目(30972075) |
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摘 要: | 锌指核酸酶已作为一种基因组编辑工具成功应用于多种有机体及细胞类型。它包括一个非特异的FokⅠ核酸内切酶DNA切割结构域和一个特异性的DNA结合结构域。可以在基因组定点产生双链断裂,并通过细胞对基因组DNA的自我修复途径使基因打靶效率提升几个数量级。当包含该位点同源区的外源DNA存在时发生同源重组修复,实现外源基因的定点敲入,无同源DNA存在时通过非同源末端连接途径产生基因突变。在锌指核酸酶技术出现前,基因打靶动物的生产主要是依靠ES细胞系上的同源重组技术或核移植基础上的克隆技术,但仅限于极少数物种。本文简要介绍这一技术作用原理和设计方法,以及它在疾病治疗,模式动物研究和动物生物反应器方面的最新研究进展,旨在展示锌指核酸酶技术的广阔前景。
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关 键 词: | 锌指核酸酶 同源重组 非同源末端连接 |
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