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| 隐孢子虫鼠基因型卵囊壁蛋白CP41基因的原核表达及抗血清的制备 | |
| 引用本文： | 于慧珠,岳城,陈兆国,米荣升,夏延富.隐孢子虫鼠基因型卵囊壁蛋白CP41基因的原核表达及抗血清的制备[J].中国预防兽医学报,2010,32(8). |
| 作者姓名： | 于慧珠 岳城 陈兆国 米荣升 夏延富 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室/上海动物生物技术研究中心,上海,200232;新疆农业大学,动物医学院,新疆,乌鲁木齐,830052 2. 新疆农业大学,动物医学院,新疆,乌鲁木齐,830052 3. 中国农业科学院上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室/上海动物生物技术研究中心,上海,200232 4. 湖南农业大学,动物医学院,湖南,长沙,410128 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划，国家"十一五"科技支撑计划，上海市科技兴农重点攻关项目 |
| 摘 要： | 为克隆和表达编码隐孢子虫鼠基因型卵囊壁蛋白CP41基因,以隐孢子虫鼠基因型卵囊总RNA作为模板,RT-PCR扩增CP41基因,克隆到pMD18-T载体并进行序列测定,构建重组质粒pGEX-5x-3-CP41,转化BL21(DE3)感受态细胞进行诱导,表达产物SDS-PAGE检测目的蛋白,westernblot分析该重组蛋白的免疫活性。结果显示,克隆的目的基因核苷酸序列与GenBank登录中的序列比较,同源性为90.5%,氨基酸序列同源性为87.57%。重组质粒转化菌在IPTG诱导下以包涵体形式高效表达,表达的融合蛋白大小约为46ku,westernblot分析显示,纯化复性后的重组蛋白可被辣根过氧化物酶标记的抗谷胱甘肽巯基转移酶(GST)单克隆抗体、隐孢子虫兔基因型感染兔血清特异性识别。ELISA检测结果表明,该蛋白3次免疫无特征病原体新西兰白兔后,兔血清特异性抗体达到较高水平,表明表达的重组蛋白具有较好的反应原性和免疫原性。 |
| 关 键 词： | 隐孢子虫鼠基因型 卵囊壁蛋白 克隆 原核表达 |
Cloning and prokaryotic expression of Cryptosporidium mouse genotype oocyst wall protein CP41 gene |
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| YU Hui-zhu,YUE Cheng,CHEN Zhao-guo,MI Rong-sheng,XIA Yan-fu.Cloning and prokaryotic expression of Cryptosporidium mouse genotype oocyst wall protein CP41 gene[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2010,32(8). | |
| Authors: | YU Hui-zhu YUE Cheng CHEN Zhao-guo MI Rong-sheng XIA Yan-fu |
| Abstract: | |
| Keywords: | CP41 |
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