番茄斑萎病毒侵染的西花蓟马酵母双杂交cDNA文库的构建和分析 |
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作者姓名: | 叶倩 卢冰心 魏艳 陈建斌 刘勇 张松柏 章松柏 郑立敏 |
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作者单位: | 1. 农林病虫害预警与调控湖北省工程技术研究中心(长江大学);2. 湖南省农业科学院植物保护研究所 |
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基金项目: | 国家重点研发计划项目(2018YFE0112600);;国家自然科学基金项目(31871935); |
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摘 要: | 【目的】探明番茄斑萎病毒(Tomatospottedwilttospovirus, TSWV)和介体西花蓟马(Frankliniella occidentalis)之间的分子互作关系,探索介体因子如何参与病毒侵染过程,以期为解析西花蓟马蛋白调控介体传毒机理奠定基础。【方法】通过若虫期饲毒获得高带毒西花蓟马群体,借助SMART技术构建TSWV侵染的西花蓟马酵母双杂交三框cDNA文库。【结果】3种读码框初级cDNA文库的库容量分别为3.0×106、2.0×106和2.0×106cfu,文库实际扩增基数大于1.5×106 cfu(3种读码框均大于5×105)。扩增文库平均插入片段主要分布在0.5~3.0kb。对文库随机挑选16个克隆,测序后与GenBank数据库比对,结果显示各插入片段具有同源序列。【结论】构建的cDNA文库具有较高的库容量和重组率,可用于后续筛选西花蓟马与TSWV互作的蛋白。
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关 键 词: | 番茄斑萎病毒 西花蓟马 酵母双杂交cDNA文库 |
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