土壤原核微生物RNA加Poly(A)尾的方法研究 |
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引用本文: | 侯海军,黄艳岚,秦红灵.土壤原核微生物RNA加Poly(A)尾的方法研究[J].湖南农业科学,2016(2). |
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作者姓名: | 侯海军 黄艳岚 秦红灵 |
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作者单位: | 1. 中国科学院亚热带农业生态研究所,亚热带农业生态重点实验室,湖南长沙410125;2. 湖南省作物研究所,湖南长沙,410125 |
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基金项目: | 国家科技支撑项目(2012BAD14B03),国家自然科学基金资助项目(41090282),“973”计划项目(2012CB417100) |
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摘 要: | 采取共提取法提取土壤微生物总RNA后,经过去DNA、过柱纯化等手段,利用Poly(A)聚合酶在纯化RNA末端添加Poly(A)尾,将产物逆转录成c DNA第一链,用细菌16S r DNA引物和nos Z(氧化亚氮还原酶基因)引物扩增目的片段。结果表明:利用此方法能够获得带有Poly(A)尾的土壤原核微生物核糖体RNA和m RNA,产物经过一次转录后,可用于扩增土壤微生物目的基因。此方法相对于利用目的基因特异下游引物来作为逆转录引物获得c DNA更加方便,用于研究土壤原核微生物多个基因的表达特征时,此方法十分实用。
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关 键 词: | 土壤 微生物 RNA 加Poly(A)尾 逆转录 |
Adding Poly (A) Tails Method for Soil Prokaryotic Microorganisms RNA |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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