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毛白杨4-香豆酸:辅酶A连接酶(4CL3)的酶学特征研究
引用本文:饶国栋,张永卓,魏弘宜,蒋湘宁,陆海,张建国.毛白杨4-香豆酸:辅酶A连接酶(4CL3)的酶学特征研究[J].林业科学研究,2013,26(5):542-547.
作者姓名:饶国栋  张永卓  魏弘宜  蒋湘宁  陆海  张建国
作者单位:1. 国家林业局林木培育重点实验室,中国林业科学研究院林业研究所,北京 100091;北京林业大学,北京 100083
2. 北京林业大学,北京,100083
3. 国家林业局林木培育重点实验室,中国林业科学研究院林业研究所,北京 100091
基金项目:北京市教育委员会科学研究与研究生培养共建项目-学科建设-森林培育(20120618)
摘    要:为了进一步研究杨树4CL基因,以毛白杨为材料克隆到一个新的毛白杨4CL3基因.生物信息学分析结果显示:该基因和其他4CL基因一样含有4CL基因家族2个保守框Box Ⅰ和Box Ⅱ.将4CL3基因连接至原核表达载体pQE30,表达纯化后测定其蛋白的比活力,结果显示:4CL3基因对不同底物表现出了不同的催化效率.对该基因的最适温度和最适pH值测定后发现:4CL蛋白的最适温度为40℃,最适pH值为8.5,且在pH =9.0时有60%的活力.采用HPLC-MS的方法,分析了4CL3蛋白对混合底物的催化情况,结果显示:在混合底物下,4CL3蛋白对4-香豆酸、阿魏酸和肉桂酸都表现较高的活力,而对芥子酸和咖啡酸没有活力.

关 键 词:4-香豆酸  辅酶A连接酶  HPLC-MS  原核表达  毛白杨
收稿时间:2012/3/19 0:00:00

Enzymatic Characteristics of 4-coumarate: coenzyme A Ligase (4CL3) from Populus tomentosa
RAO Guo-dong,ZHANG Yong-zhuo,WEI Hong-yi,JIANG Xiang-ning,LU Hai and ZHANG Jian-guo.Enzymatic Characteristics of 4-coumarate: coenzyme A Ligase (4CL3) from Populus tomentosa[J].Forest Research,2013,26(5):542-547.
Authors:RAO Guo-dong  ZHANG Yong-zhuo  WEI Hong-yi  JIANG Xiang-ning  LU Hai and ZHANG Jian-guo
Institution:Key Laboratory of Tree Breeding and Cultivation, State Forestry Administration, Research Institute of Forestry, Chinese Academy of Forestry, Beijing 100091, China;Beijing Forestry University, Beijing 100083, China;Beijing Forestry University, Beijing 100083, China;Beijing Forestry University, Beijing 100083, China;Beijing Forestry University, Beijing 100083, China;Beijing Forestry University, Beijing 100083, China;Key Laboratory of Tree Breeding and Cultivation, State Forestry Administration, Research Institute of Forestry, Chinese Academy of Forestry, Beijing 100091, China
Abstract:
Keywords:4CL  HPLC-MS  prokaryotic expression  Populus tomentosa
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