| 草鱼肠道胰蛋白酶同工酶GT-B的纯化及性质 |
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| 引用本文： | 刘忠义,王璋,许时婴,徐琳娜.草鱼肠道胰蛋白酶同工酶GT-B的纯化及性质[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2007,33(5):497-506. |
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| 作者姓名： | 刘忠义 王璋 许时婴 徐琳娜 |
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| 作者单位： | 江南大学,食品科学研究所,教育部食品科学与安全重点实验室,江苏,无锡,214036 |
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| 基金项目： | 江苏省科技厅农业、苏北星火带科技攻关课题 |
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| 摘 要： | 深入了解草鱼消化蛋白酶的性质有利于充分探讨草鱼内脏的可利用途径和研究草鱼消化生理学.将草鱼肠道用冰丙酮脱脂,用磷酸盐缓冲溶液提取,然后经过硫酸铵粗分级沉淀,再经过离子交换层析、凝胶层析等纯化,分离得到一种碱性蛋白酶.SDS-PAGE分析表明其相对分子质量为26400.SDS-底物-PAGE以及抑制实验等表明酶可以水解酪蛋白和N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐(BAEE),其活性被大豆胰蛋白酶抑制剂(SBTI)和甲苯磺酰氟(PMSF)强烈抑制,表明这是一种胰蛋白酶,命名为GT-B.用BAEE作底物时,该酶的最适作用温度为45℃,在65℃加热20 min,酶活性基本丧失;最适作用pH为8.5,在pH5.5～10.5范围内保持稳定,但在酸性环境里很容易失去活性.该酶的Vmax和Km值分别为3.33×103 min-1和31.68 μmol·mL-1,其生理转化效率高,为105.26 mL·μmol-1·min-1.该酶催化水解合成底物时的活化能Ea比较低,为18.31 kJ·mol-1.其活性不受Ca2+的影响,但是Ca2+能提高该酶的热稳定性.Zn2+, Cu2+, Hg2+和 Al3+等的存在会使此酶活性降低.
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| 关 键 词： | 草鱼 胰蛋白酶 纯化 性质 电泳 |
| 文章编号： | 1008-9209（2007）05-0497-10 |
| 修稿时间： | 2006-11-01 |
Purification and properties of trypsin isoform B from intestines of grass carp(Ctenopharyngodon idellus) |
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| LIU Zhong-yi,WANG Zhang,XU Shi-ying,XU Lin-na.Purification and properties of trypsin isoform B from intestines of grass carp(Ctenopharyngodon idellus)[J].Journal of Zhejiang University(Agriculture & Life Sciences),2007,33(5):497-506. |
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| Authors: | LIU Zhong-yi WANG Zhang XU Shi-ying XU Lin-na |
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| Institution: | Key Laboratory of Food Science and Safety of Ministry of Education,Institute of Food Science,Southern Yangtze University,Wuxi,Jiangsu 214036,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | grass carp trypsin purification property electrophoresis |
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