猪卵母细胞在GV期与MⅡ期的冷冻保存效果比较研究

为比较猪卵母细胞在GV期与MⅡ期的冷冻保存效果，试验在这两个成熟阶段对其进行玻璃化冷冻，GV期卵母细胞解冻后培养至成熟，MⅡ期卵母细胞解冻后恢复2 h，然后采用免疫荧光标记、Western blotting和链霉蛋白酶溶解方法分别检测它们的皮质颗粒分布、CD9蛋白表达水平和透明带消化时间上的差异。结果表明，GV期卵母细胞在解冻后2 h的存活率显著低于MⅡ期卵母细胞（P<0.05），但极体排出率与对照卵母细胞无明显差异（P>0.05）；在冷冻MⅡ期卵母细胞中，皮质颗粒的皮质区分布比例和CD9的蛋白表达水平显著下降（P<0.05），但冷冻GV期卵母细胞经体外成熟后则无明显变化（P>0.05）；冷冻GV期与MⅡ期卵母细胞均不会影响透明带的消化时间（P>0.05）。由此可见，猪卵母细胞在GV期的冷冻存活率虽然较MⅡ期低，但其体外成熟后极体排出率、皮质颗粒分布和CD9蛋白表达水平均未受到冷冻的影响。