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猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP快速检测方法的建立
引用本文:陈希文,汪谦,尹苗,李莲,罗文涛,杨凤,郭爱伟,周杰珑,王雄清. 猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP快速检测方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2017, 44(6): 1630-1636. DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.06.008
作者姓名:陈希文  汪谦  尹苗  李莲  罗文涛  杨凤  郭爱伟  周杰珑  王雄清
作者单位:1. 绵阳师范学院动物应用技术研究所, 绵阳 621000;
2. 四川铁骑力士集团冯光德实验室, 绵阳 621006;
3. 西南林业大学生命科学学院, 昆明 650224
基金项目:四川省科技厅项目(2013JY0127);四川省重点实验室项目(ESP1505);四川省教育厅项目(16ZA0321)
摘    要:为建立一种快速、灵敏、简便的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)早期检测方法,本研究利用逆转录环介导恒温扩增技术(RT-LAMP),针对PRRSV的ORF5基因片段设计了4条引物,利用Bst DNA聚合酶在65 ℃恒温条件下进行逆转录扩增,通过1.0%琼脂糖凝胶电泳和加入SYBR Green Ⅰ染料肉眼判断结果,建立了PRRSV RT-LAMP检测方法。结果表明,该检测方法具有良好的特异性,与其他常见病毒如猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒等无交叉反应,较普通RT-PCR灵敏性高100倍。采用RT-LAMP和RT-PCR分别对10份临床样本同时进行检测,符合率为100%。因此,本研究建立的RT-LAMP是一种可适用于临床PRRSV检测的快速、简单、灵敏、特异的检测方法。

关 键 词:逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)  猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)  快速检测  

Establishment of RT-LAMP for Rapid Detection of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus
CHEN Xi-wen,WANG Qian,YIN Miao,LI Lian,LUO Wen-tao,YANG Feng,GUO Ai-wei,ZHOU Jie-long,WANG Xiong-qing. Establishment of RT-LAMP for Rapid Detection of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2017, 44(6): 1630-1636. DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.06.008
Authors:CHEN Xi-wen  WANG Qian  YIN Miao  LI Lian  LUO Wen-tao  YANG Feng  GUO Ai-wei  ZHOU Jie-long  WANG Xiong-qing
Affiliation:1. Institute of Applied Animal Technology, Mianyang Normal University, Mianyang 621000, China;
2. Fengguangde Laboratory of Sichuan Tieqilishi Group, Mianyang 621006, China;
3. College of Life Science, Southwest Forestry University, Kunming 650224, China
Abstract:
Keywords:
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