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猪瘟病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立和初步应用
引用本文:王荣,孔繁德,陈琼,吴德峰,徐淑菲.猪瘟病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立和初步应用[J].经济动物学报,2009,13(1):39-42.
作者姓名:王荣  孔繁德  陈琼  吴德峰  徐淑菲
作者单位:[1]福建农林大学动物科学学院,福州350002 [2]厦门出入境检验检疫局,厦门361012 [3]厦门市农产品质量安全检验测试中心,厦门361009
基金项目:厦门出入境检验检疫局科技计划项目(XK09-2003)
摘    要:根据GenBank已发表的HCV 5’NTR核苷酸序列设计一对特异性引物,扩增位置在整个基因的221~377位,片段长度为167bp。提取由厦门出入境检验检疫局技术中心动物实验室保存的HCV细胞毒的RNA,并反转录成cDNA,以此cDNA为模板建立了SYBR Green I实时定量PCR检测猪瘟病毒的方法,并用该方法检测送检的临床疑似病料。结果表明:本研究建立的HCV-SYBR Green I PCR特异性强,与FMDV、PCV2、PRRSV、PPV、PRV等常见猪病毒病病原没有交叉反应;灵敏度高,可以检测到5.3×10^2的病毒拷贝数;操作简单,耗时短,只需3h即可完成整个试验过程,可初步用于临床检测。

关 键 词:SYBR  Green  I  HCV  检测

Development and Application of SYBR Green I Real-Time PCR Technique for Detecting Hog Cholera Virus
WANG Rong,KONG Fan-de,CHEN Qiong,WU De-feng,XU Shu-fei.Development and Application of SYBR Green I Real-Time PCR Technique for Detecting Hog Cholera Virus[J].Journal of Economic Animal,2009,13(1):39-42.
Authors:WANG Rong    KONG Fan-de  CHEN Qiong  WU De-feng  XU Shu-fei
Institution:1.College of Animal Science;Fujian Agriculture and Forestry University;Fuzhou 350002;China;2.Xiamen Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau;Xiamen 361012;3.Xiamen Agricultural Product Quality and Safety Testing Center;Xiamen 361009;China
Abstract:
Keywords:SYBR Green I  HCV  detection  
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