| 摘 要： | 为快速检测食源性动物中沙拉沙星及二氟沙星的药物残留,将沙拉沙星单克隆抗体(SAR-Ab)与辣根过氧化物酶(HRP)偶联得到酶标抗体(McAb-HRP),从而建立直接竞争化学发光酶联免疫(dc-CLEIA)检测方法。结果显示:经紫外扫描鉴定,McAb-HRP偶联成功;以包被抗原(SAR-1-OVA)浓度1.25μg/mL,McAb-HRP稀释比1∶8 000作为最佳工作条件,从而建立了dc-CLEIA分析法;精密度的平均批内批间变异系数均低于7%;建立的标准曲线呈线性关系,线性范围为0.312～20 ng/mL,回归方程式y=-0.373x+0.688(R~2=0.985),经计算其灵敏度IC_(50)为3.19 ng/mL;除二氟沙星外与其他氟喹诺酮类药物的交叉反应率均低于8%,与其他种类的抗生素均无交叉反应;沙拉沙星和二氟沙星在鸡肉样品中的最低检出限分别为1.25、1.36μg/kg;沙拉沙星和二氟沙星在鸡肉样品中的添加回收率分别为88.2%～108.3%、93.36%～102.7%,且其变异系数均≤13.4%。结果表明:此方法不仅快速且灵敏度高,可作为沙拉沙星及二氟沙星药物残留的定量检测方法。
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