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锯缘青蟹精氨酸激酶基因的克隆与表达
引用本文:阮韦伟,沈苑,曹敏杰,苏文金,蔡秋风,刘光明.锯缘青蟹精氨酸激酶基因的克隆与表达[J].厦门水产学院学报,2011(5):346-351.
作者姓名:阮韦伟  沈苑  曹敏杰  苏文金  蔡秋风  刘光明
作者单位:[1]集美大学生物工程学院,福建厦门361021 [2]福建省高校水产科学技术与食品安全重点实验室,福建厦门361021
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31071519); 福建省自然科学基金资助项目(2010J06012 2008J0067); 福建省科技计划重点资助项目(2010N0019); 福建省高校新世纪优秀人才计划资助项目(NCETFJ-2007); 集美大学创新团队基金资助项目(2010A005); 李尚大集美大学学科建设基金资助项目(ZC2010008)
摘    要:通过分子生物学方法,克隆得到锯缘青蟹(Scylla serrata)精氨酸激酶(Arginine Kinase,AK)开放阅读框基因序列.测序结果显示:该开放阅读框基因的序列长度为1 071 bp,编码356个氨基酸残基;该序列登录Genbank(GQ:851626),序列比对结果显示,锯缘青蟹精氨酸激酶与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)精氨酸激酶的氨基酸序列同源性高达94%,与岸蟹(Carcinus maenas)、中华绒鳌蟹(Eriocheir sinensis)等甲壳类动物的精氨酸激酶也有较高的同源性,均高于90%;将克隆得到的锯缘青蟹精氨酸激酶基因与pGEX-4T-3载体连接,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导得到分子质量为65 ku的融合表达蛋白(GST-AK),经兔抗锯缘青蟹精氨酸激酶多克隆抗体的免疫印迹分析证实,GST-AK具有抗原性.

关 键 词:锯缘青蟹  精氨酸激酶  过敏原  cDNA克隆  重组表达
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