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| 两轮多重反转录巢式PCR方法扩增全长GalUR基因 | |
| 引用本文： | 杨静慧,Mark Hodges. 两轮多重反转录巢式PCR方法扩增全长GalUR基因[J]. 农业生物技术学报, 2005, 13(6): 728-732 |
| 作者姓名： | 杨静慧 Mark Hodges |
| 作者单位： | 1. 天津农学院园艺系,天津,300381 2. Nova Scotia 农学院植物动物科学系,Truro,NS,加拿大,B2N 5E3 3. 加拿大农业食品研究院园艺研究中心,Kentville,NS,加拿大,B4N 1J5 |
| 基金项目： | Foundation supported by Atlantic Food and Horticulture Research Centre AAFC in Canada, Tianjin Science and Technique Committee and Tianjin Education Committee in China. |
| 摘 要： | 研究了两轮多重反转录巢式PCR扩增全长基因的方法.先用多重巢式引物和cDNA进行第1轮PCR扩增;再用纯化的第1轮PCR产物和相同的引物进行第2轮扩增;最后通过改变Mg^2＋浓度、退火时间和退火温度进行PCR条件的优化,以增加PCR扩增的产量,用于克隆.结果显示该方法方便和快速地扩增出了草莓（Fragaria ananassa cv.SweatCharlie）高产量和高质量的全长GalUR基因,也非常快速地扩增出了用于基因构建的带有酶切位点的全长GalUR基因.该方法也可以用于其它全长基因的克隆. |
| 关 键 词： | 两轮多重扩增 巢式PCR 全长基因 GalUR |
| 收稿时间： | 2004-09-14 |
| 修稿时间： | 2004-11-26 |
Multiplex Reverse Transcription-nested-double PCR for Generation of Full-length Open Reading Frames of GalUR Gene |
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| YANG Jing-Hui,Gefu Wang-Pruski,Mark Hodges. Multiplex Reverse Transcription-nested-double PCR for Generation of Full-length Open Reading Frames of GalUR Gene[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2005, 13(6): 728-732 | |
| Authors: | YANG Jing-Hui Gefu Wang-Pruski Mark Hodges |
| Affiliation: | 1. Department of Horticulture, Tianjin Agricultural College, Tianjin 300381, China; 2. Department of Plant and Animal Sciences, Nova Scotia Agricultural College, Truro, NS, Canada B2N 5E3; 3. Atlantic Food and Horticulture Research Centre, Agriculture and Agri-food Canada, Kentville, NS, Canada B4N 1 JS |
| Abstract: | |
| Keywords: | double- multiplex amplification nested PCR full-length gene GalUR |
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