猕猴桃溃疡病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用

为建立猕猴桃溃疡病病原菌PSA的实时荧光定量PCR方法，根据hrpW基因设计一对引物P3F/P5R，扩增片段大小为247bp，构建该片段的阳性质粒用于荧光定量 PCR标准曲线的制作；评价引物的灵敏度、特异性，并验证其实际应用效果。结果表明，该方法能特异性的检测出PSA病原菌，灵敏度为 100fg/μL。以采集的无病症和有病症猕猴桃枝条为样品，本方法可检测到无病症枝条中最低浓度为8.45?0‐5ng/μL的PSA。本实验建立的实时荧光定量PCR检测猕猴桃溃疡病菌方法可用于猕猴桃溃疡病感病样品的早期诊断，对该病原菌的预防诊治具有重要意义。