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| 北美海蓬子盐胁迫条件下抑制差减文库构建与分析 | |
| 引用本文： | 李吉涛,龙建琪,叶妙水,张桂和,郭建春.北美海蓬子盐胁迫条件下抑制差减文库构建与分析[J].分子植物育种,2007,5(3):377-383. |
| 作者姓名： | 李吉涛 龙建琪 叶妙水 张桂和 郭建春 |
| 作者单位： | 1. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海口,571101 2. 湖南省桃江县农业局,桃江,413400 3. 海南大学海洋学院,海口,570228 |
| 基金项目： | 海南省教育厅科研基金重项目 , 海南省自然科学基金 , 中国热带农业科学院资助项目 |
| 摘 要： | 北美海蓬子(Salicornia Bigelovii Torr.)是一种耐盐性极强的真盐生植物,在200 mmol/L的Na 浓度下生长,其高度和含汁量是5 mmol/L Na 浓度下生长的2倍和2.5倍.为了研究北美海蓬子耐盐的机理和分离耐盐新基因,我们构建了在盐胁迫条件下北美海蓬子基因表达差异的SSH文库.以北美海蓬子种子播种于0 mmol/L NaC1 MS液体培养基上幼苗(0号材料)的总RNA为Driver,200 mmol/L NaCl诱导24 h幼苗(2号材料)的总RNA为Tester,运用SMART PCR cDNA合成技术分别合成全长cDNA.将两种cDNA群体进行抑制差减杂交,用T/A法分别构建了盐胁迫相关基因的正向差减文库(205个克隆子)和反向差减文库(235个克隆子).通过PCR和反式Northern Dot.Blot消除假阳性和重复克隆子,得到在盐胁迫下特异表达的阳性克隆85个.对测序结果正常的81个克隆进行BLASTn分析,其中有70个cDNA序列与已经报道的其它物种的核酸序列具有较高的同源性;另外11个cDNA序列未找到有较高相似性的已知序列.81个cDNA序列中没有与北美海蓬子中已报道的核酸序列有较高的相似性,因此,所有81个克隆序列都是北美海蓬子中的新基因. |
| 关 键 词： | 北美海蓬子(Salicornia Bigelovii Torr.) 盐胁迫 抑制差减文库 |
Construction and Analysis of Differentially Expressed cDNA Library of Salicornia Bigelovii by Using Suppression Subtractive Hybridization |
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| Li Jitao,Long Jianqi,Ye Miaoshui,Zhang Guihe,Guo Jianchun.Construction and Analysis of Differentially Expressed cDNA Library of Salicornia Bigelovii by Using Suppression Subtractive Hybridization[J].Molecular Plant Breeding,2007,5(3):377-383. | |
| Authors: | Li Jitao Long Jianqi Ye Miaoshui Zhang Guihe Guo Jianchun |
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