新牧1号苜蓿抗逆相关基因MvNHX1启动子表达载体的构建 |
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作者姓名: | 代文俊 朱彦卓 晁朝霞 任燕萍 |
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作者单位: | 新疆农业大学农业生物技术重点实验室,新疆农业大学农学院 |
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基金项目: | 新疆农业大学大学生创新项目(jqztp72013009) |
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摘 要: | 为了进一步研究新牧1号苜蓿抗逆相关基因MvNHX1启动子的功能,采用双酶切的方法,用核酸内切酶SacⅠ和NcoⅠ分别双酶切pCAMBIA1304质粒和阳性重组质粒pEASY-T1-simple-pMvNHX1,然后回收目的片段。通过T4DNA连接酶将目的片段和空载体相连后获得连接产物。将连接产物导入到宿主菌DH5α,通过画板,卡那霉素筛选后挑单菌落摇菌。然后用菌液PCR及双酶切鉴定该载体后,用冻融法将其导入农杆菌EHA105。结果表明,成功培养出含有抗逆相关基因MvNHX1启动子pMvNHX1∶GUS∶EHA105的菌落;成功构建出新的植物表达载体pMvNHX1∶GUS。
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关 键 词: | 诱导型启动子 MvNHX1启动子 表达载体构建 |
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