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鸭坦布苏病毒E蛋白Domain Ⅲ单克隆抗体胶体金试纸条的创制及应用
引用本文:阚莹,张淼,卢奇,吕炫,于胜祖,王习强,姜雅倩,王蓓,朱英奇,王晴,王桂军. 鸭坦布苏病毒E蛋白Domain Ⅲ单克隆抗体胶体金试纸条的创制及应用[J]. 中国动物检疫, 2023, 40(2): 131-138
作者姓名:阚莹  张淼  卢奇  吕炫  于胜祖  王习强  姜雅倩  王蓓  朱英奇  王晴  王桂军
作者单位:安徽农业大学动物科技学院
基金项目:国家自然科学基金面上项目(32072874);安徽省家禽产业技术体系项目(AHJQCYTX-06-11)
摘    要:为建立一种快速诊断鸭坦布苏病毒(DTMUV)的方法,以2株(B9D7B8G10和B9D10C7株)抗DTMUV的单克隆抗体制备DTMUV胶体金免疫层析试纸条。采用经典的柠檬酸钠还原法制备胶体金溶液,利用rProtein G琼脂糖凝胶亲和层析法对两株单克隆抗体腹水进行纯化并鉴定;以纯化的B9D7B8G10株单克隆抗体作为标记抗体,通过调节单克隆抗体浓度与pH确定胶体金探针最佳结合条件;同时,在硝酸纤维素膜(NC膜)检测带包被纯化的B9D10C7株单克隆抗体,质控带包被山羊抗小鼠IgG抗体,建立检测DTMUV胶体金免疫层析试纸条;成功建立试纸条后,对试纸条敏感性、特异性、重复性和稳定性进行检测,并与RT-PCR检测方法进行比较,对200份临床疑似感染样品进行检测。结果显示:制备的胶体金试纸条在15 min内即可完成检测,最低检测稀释度为1:50,且不与鸭瘟病毒、番鸭细小病毒、鹅星状病毒、禽白血病病毒发生交叉反应;应用试纸条和RT-PCR方法分别对200份临床疑似样品进行检测,两者符合率达98%。结果表明,制备的胶体金试纸条敏感性高、特异性强、稳定性好、重复性好,为DTMUV的快速检测提供了...

关 键 词:鸭坦布苏病毒  胶体金  单克隆抗体  免疫层析试纸条

Development and Application of Colloidal Gold Test Strips Based on Monoclonal Antibodies against Duck Tembusu Virus E Protein Domain III
Abstract:
Keywords:
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