降钙素基因相关肽在牦牛附睾中的定位与表达 |
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作者姓名: | 陈少宇 袁莉刚 杨大鹏 等 |
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作者单位: | 甘肃农业大学 动物医学院 甘肃省动物生殖生理及繁殖调控重点实验室 |
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基金项目: | 甘肃省动物生殖生理及繁殖调控重点实验室建设项目(20JR10RA563);甘肃农业大学科技创新基金项目(GAU-XKJS-2018-056);宁夏回族自治区农业特色优势产业育种专项(2013NYYZ0402) |
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摘 要: | 【目的】分析降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)在牦牛附睾中的转录水平及蛋白分布特点,探究其对精子运输及成熟的功能。【方法】采集6头3~4岁健康成年牦牛的附睾,将其解剖为头、体、尾三部分,应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blotting分别检测CGRP mRNA和蛋白在附睾的头、体、尾中的表达水平;采用H.E染色法分析附睾组织结构特点;采用免疫组化和免疫荧光技术分析附睾各部分CGRP的分布及表达情况。【结果】RT-qPCR结果表明,CGRP在牦牛附睾头的相对表达量显著高于附睾体和附睾尾(P<0.05),附睾尾表达量最低(P<0.05);Western blotting检测结果表明,CGRP蛋白水平在附睾尾中的表达水平显著高于附睾头和附睾体(P<0.05)。显微镜下观察表明,牦牛附睾组织纤毛长度从头部至尾部逐渐降低,差异显著;附睾头间质组织的间质平滑肌层厚度显著低于附睾体和附睾尾(P<0.05);基细胞和晕细胞在附睾尾分布显著,上皮厚度亦在附睾尾显著降低。免疫组化及免疫荧光分析发现,CGRP主要分布于附睾上皮、基底膜及附睾间质小血管,附睾上皮晕细胞的表达强度最高。【结论】CGRP主要分布于牦牛附睾上皮和间质小血管,提示CGRP对牦牛附睾间质小血管的收缩发挥调节作用。牦牛附睾尾晕细胞数量最多,晕细胞中CGRP的高强度表达提示其可能参与附睾尾的免疫调节。
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关 键 词: | 降钙素基因相关肽(CGRP);牦牛;附睾;晕细胞 |
收稿时间: | 2022-01-13 |
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