| 鉴别牛结节性皮肤病病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 赵钟毅,闭璟珊,尹德玮,吕荞,吴健皓,韦正吉,邹联斌,苏姣秀,汪伟,辛佳亮,彭久青,李文静,郑敏,胡传活.鉴别牛结节性皮肤病病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立及应用[J].中国动物检疫,2023,40(2):117-124. |
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| 作者姓名： | 赵钟毅 闭璟珊 尹德玮 吕荞 吴健皓 韦正吉 邹联斌 苏姣秀 汪伟 辛佳亮 彭久青 李文静 郑敏 胡传活 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学动物科学技术学院;2. 广西动物疫病预防控制中心;3. 温州大学病毒学研究所;4. 四川农业大学动物医学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31360601，31560707）；广西农业科技项目（Z201953） |
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| 摘 要： | 为实现牛结节性皮肤病病毒（LSDV）和羊痘病毒属（CaPV）其他成员的鉴别诊断，针对LSDV 010基因保守区域设计特异性引物及Taq Man探针，与文献报道的CaPV 068基因的通用引物及探针组合，通过优化反应体系和条件，建立了一种可同时鉴别检测LSDV和CaPV其他成员的双重荧光定量PCR检测方法。结果显示：本方法可以特异性扩增LSDV和CaPV其他成员，并且与其他牛、羊病毒无交叉反应，特异性好；对pLSDV-010和pCaPV-068质粒标准品的最低检测限均为15 copies/μL，具有较高的灵敏性；组内和组间变异系数均小于1.75%，重复性良好。应用本试验建立的方法与荧光定量PCR方法同时检测542份临床样品，发现CaPV的样品符合率为98.52%,LSDV为99.63%。本试验建立的方法为CaPV鉴别筛查、LSDV精准防控及流行病学调查提供了快捷有效的技术手段。
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| 关 键 词： | 牛结节性皮肤病病毒 羊痘病毒属 双重荧光定量PCR Taq Man探针 鉴别检测 |
Development and Application of a Duplex Real-time Quantitative PCR Assay for Identifying Lumpy Skin Disease Virus |
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| Zhao Zhongyi,Bi Jingshan,Yin Dewei,Lyu Qiao,Wu Jianhao,Wei Zhengji,Zou Lianbin,Su Jiaoxiu,Wang Wei,Xin Jialiang,Peng Jiuqing,Li Wenjing,Zheng Min,Hu Chuanhuo.Development and Application of a Duplex Real-time Quantitative PCR Assay for Identifying Lumpy Skin Disease Virus[J].China Journal Of Animal Quarantine,2023,40(2):117-124. |
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| Authors: | Zhao Zhongyi Bi Jingshan Yin Dewei Lyu Qiao Wu Jianhao Wei Zhengji Zou Lianbin Su Jiaoxiu Wang Wei Xin Jialiang Peng Jiuqing Li Wenjing Zheng Min Hu Chuanhuo |
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