禺毛茛SRAP反应体系优化及引物筛选 |
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引用本文: | 赵中伟,李同建,徐婧,廖亮,徐玲玲. 禺毛茛SRAP反应体系优化及引物筛选[J]. 江苏农业科学, 2009, 0(4) |
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作者姓名: | 赵中伟 李同建 徐婧 廖亮 徐玲玲 |
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作者单位: | 1. 九江学院生命科学学院,江西九江,332000;江西农业大学园林与艺术学院,江西南昌,330045 2. 九江学院生命科学学院,江西九江,332000 |
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摘 要: | 以禺毛茛叶片DNA为模板,采用正交试验设计,以10×Buffer、Mg2+、dNTP和引物4种因素3个水平,对禺毛茛SRAP反应体系进行研究,并比较了不同浓度模板DNA、Taq酶用量对扩增效果的影响,建立了禺毛茛的SRAP最佳反应体系.结果表明,禺毛茛SRAP-PCR最佳反应体系为:20 μl反应体系中,10×Buffer 2.5 μl,25 mmol/L Mg2+ 2.5 μl,2 mmol/L dNTPs 1.5 μl,5 μmol/L引物1.0 μl,模板量为100~200 ng,Taq酶0.5 U.运用该体系对10份禺毛茛进行验证,证明该体系稳定可靠,并从100个SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的36个引物组合.这一优化的体系及多态性引物组合为利用SRAP标记技术进行毛茛属植物分子遗传学研究提供了科学依据.
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关 键 词: | 禺毛茛 SRAP标记 体系优化 引物筛选 |
Optimization of SRAP-PCR system in Ranunculus cantoniensis and selection of primers |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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