| 检测猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR方法的建立 |
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| 引用本文： | 刘俊平,庄金山,孙志,张建武,陶琦,袁世山.检测猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR方法的建立[J].上海交通大学学报(农业科学版),2007,25(5):483-488. |
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| 作者姓名： | 刘俊平 庄金山 孙志 张建武 陶琦 袁世山 |
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| 作者单位： | 1. 上海出入境检验检疫局,上海,200135
2. 中国农业科学院,上海兽医研究所,上海,200232 |
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| 摘 要： | 针对猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2的序列设计两对特异性引物及TaqMan探针,以感PCV2的PK-15细胞培养上清的DNA提取物为模板,分别扩增499 bp和131 bp的片段,建立了检测PCV2的TaqMan荧光PCR方法。结果表明:TaqMan荧光PCR检测PCV2的最佳探针浓度为0.5 pmol·μL-1;TaqMan荧光PCR两步法操作快捷,扩增131 bp的引物PCF1101/PCR1232检测敏感性高(3.17×102拷贝·μL-1),重复性好。在诸多检测样品中,除检测到PCV2检测指标出现阳性外,猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV),日本乙型脑炎病毒(JEV),猪伪狂犬病毒(PRV),猪瘟病毒(CSFV)及PK-15细胞等检测指标均为阴性,表明特异性强;与普通PCR的检测结果(2/10)比较,本法的敏感性和对临床样品的阳性检出率(3/10)更高。上述研究表明,本方法快速、敏感、特异,具有很高的重复性,且可实时监测,能有效检测PCV2。
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 TaqMan荧光PCR 检测 |
| 文章编号： | 1671-9964（2007）05-0483-06 |
| 收稿时间： | 2007-03-05 |
| 修稿时间： | 2007年3月5日 |
Establishment of TaqMan Fluorescent Quantitative PCR for Detection of Porcine Circovirus Type 2 |
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| LIU Jun-ping,ZHUANG Jin-shan,SUN Zhi,ZHANG Jian-wu,TAO Qi,YUAN Shi-shan.Establishment of TaqMan Fluorescent Quantitative PCR for Detection of Porcine Circovirus Type 2[J].Journal of Shanghai Jiaotong University (Agricultural Science),2007,25(5):483-488. |
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| Authors: | LIU Jun-ping ZHUANG Jin-shan SUN Zhi ZHANG Jian-wu TAO Qi YUAN Shi-shan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine circovirus 2 type TaqMan fluorescent quantitative PCR detection |
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