| 橡胶树乳管特异性启动子连接HbHMGR1基因的易碎胚性愈伤组织转化 |
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| 引用本文： | 李哲,贺永国,黄绵佳,曾宪海,林位夫,刘洁琼,张春红,李运合,马晓晓.橡胶树乳管特异性启动子连接HbHMGR1基因的易碎胚性愈伤组织转化[J].南方农业学报,2016(5):597-603. |
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| 作者姓名： | 李哲 贺永国 黄绵佳 曾宪海 林位夫 刘洁琼 张春红 李运合 马晓晓 |
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| 作者单位： | 1. 中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室,海南儋州,571737;2. 海南大学园艺园林学院,海口,570228;3. 中国热带农业科学院南亚热带作物研究所,广东湛江,524091;4. 海南大学农学院,海口,570228 |
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| 基金项目： | 中国热带农业科学院基本科研业务费专项项目(1630022013029) |
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| 摘 要： | 【目的】以3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶1基因(Hb HMGR1)乳管表达载体p CAMBIA2301-PHEV2.1-Hb HMGR1转化橡胶树易碎胚性愈伤组织,获得抗性转基因材料,为研究Hb HMGR1基因的乳管特异性表达及提高橡胶产量打下基础。【方法】用根癌农杆菌EHA105介导表达载体p CAMBIA2301-PHEV2.1-Hb HMGR1转化橡胶树品种热研8-79花药易碎胚性愈伤组织,经卡那霉素筛选数月后,对抗性愈伤组织进行GUS染色和分子检测。【结果】经过对根癌农杆菌侵染的易碎愈伤组织进行4~6个月筛选,得到5个GUS检测呈阳性的抗性愈伤组织系;取其中的2号和11号抗性愈伤组织系进行PCR鉴定,均能扩增出与阳性对照相同的特异片段,uid A、NPTII和PHEV2.1-Hb HMGR1序列的目的片段大小分别为829、797和3592 bp。2号和11号抗性愈伤组织系经反向PCR鉴定,发现2号抗性愈伤组织系未扩增出目的条带,而11号抗性愈伤组织系扩增获得一条约2000 bp的条带,包含T-DNA序列和一段未知的DNA序列,其中未知DNA序列是橡胶树品种热研8-79基因组的一段连续序列。【结论】将植物表达载体的T-DNA整合到抗性愈伤组织系基因组DNA中,可获得一个含35S-NPTII-PHEV2.1-Hb HMGR1-35S-uid A的转基因愈伤组织系。
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| 关 键 词： | 橡胶树 HbHMGR1基因 乳管特异性启动子PHEV2.1 易碎愈伤组织 遗传转化 |
Transformation of friable embryogenic callus with HbHMGR1 gene connected with laticifer specific promoter in Hevea brasiliensis |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hevea brasiliensis HbHMGR1 gene laticifer specific promoter PHEV2 1 friable callus genetic transformation |
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