| 枇杷iPBS分子标记的PCR体系优化与引物筛选 |
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| 引用本文： | 顾林平,张冰,费艳,王化坤,王鹏凯.枇杷iPBS分子标记的PCR体系优化与引物筛选[J].中国南方果树,2019(1):41-46. |
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| 作者姓名： | 顾林平 张冰 费艳 王化坤 王鹏凯 |
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| 作者单位： | 江苏省苏州市吴中区金庭镇农林服务站;江苏省太湖常绿果树技术推广中心;江苏省农业种质资源保护与利用平台;苏州农业职业技术学院 |
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| 基金项目： | 江苏省农业科技自主创新资金[CX(17)2016];江苏省苏州市科技计划项目(SNG201632)资助 |
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| 摘 要： | 以枇杷的DNA为模板进行iPBS-PCR扩增,采用预备试验中效果较好的iPBS分子标记引物2241,对枇杷iPBS-PCR反应体系中的dNTP、Mg2+、引物、模板用量进行优化。根据检测结果确定枇杷iPBS-PCR使用10×Taq buffer 2μL,25mM Mg2+1.6μL,2.5mM dNTP 1.6μL,10μmol/L Primer 1μL,5U/μL Taq酶0.2μL,模板DNA 5ng的20μL反应体系。反应程序中的退火温度可以参考iPBS引物理论Tm值。对33条iPBS引物扩增测试的结果显示在该反应体系下可以筛选到谱带清晰、多态性好的引物22条,可用于枇杷的分子标记分析。
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| 关 键 词： | 枇杷 iPBS分子标记 体系优化 引物筛选 |
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