家蚕抗菌肽Cecropin D基因的原核表达、纯化及抑菌活性测定 |
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作者姓名: | 章玉萍 牛晓利 曹玉桥 范涛 代君君 王储言 吴传华 刘健 |
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作者单位: | 1. 安徽省农业科学院蚕桑研究所,安徽合肥,230061 2. 石药集团河北中润制药有限公司,河北石家庄,050000 |
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基金项目: | 安徽省农业科学院院长青年创新基金项目,现代农业产业技术体系建设专项,安徽省蚕桑产业技术体系 |
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摘 要: | 根据在家蚕品系菁松和菁松近等基因系添食家蚕浓核病病毒(BmDNV)前后差异表达的抗菌肽Cecropin D,构建重组表达载体pET-41b-CecD,将测序正确的载体转化到E.coli BL21菌株中进行诱导表达,并对诱导条件进行优化。诱导产物用蛋白质印迹(western blot)进行验证。可溶性分析发现谷胱甘肽硫转移酶(GST)融合抗菌肽部分可溶,部分在表达过程中形成包涵体。GST亲和层析纯化后,分别检测重组抗菌肽的抗菌活性,结果表明:纯化后的重组抗菌肽可以很好地抑制并杀灭细菌,其效果与抗生素卡那霉素相似。
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关 键 词: | 家蚕 抗菌肽 原核表达 |
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