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家蚕抗菌肽Cecropin D基因的原核表达、纯化及抑菌活性测定
作者姓名:章玉萍  牛晓利  曹玉桥  范涛  代君君  王储言  吴传华  刘健
作者单位:1. 安徽省农业科学院蚕桑研究所,安徽合肥,230061
2. 石药集团河北中润制药有限公司,河北石家庄,050000
基金项目:安徽省农业科学院院长青年创新基金项目,现代农业产业技术体系建设专项,安徽省蚕桑产业技术体系
摘    要:根据在家蚕品系菁松和菁松近等基因系添食家蚕浓核病病毒(BmDNV)前后差异表达的抗菌肽Cecropin D,构建重组表达载体pET-41b-CecD,将测序正确的载体转化到E.coli BL21菌株中进行诱导表达,并对诱导条件进行优化。诱导产物用蛋白质印迹(western blot)进行验证。可溶性分析发现谷胱甘肽硫转移酶(GST)融合抗菌肽部分可溶,部分在表达过程中形成包涵体。GST亲和层析纯化后,分别检测重组抗菌肽的抗菌活性,结果表明:纯化后的重组抗菌肽可以很好地抑制并杀灭细菌,其效果与抗生素卡那霉素相似。

关 键 词:家蚕  抗菌肽  原核表达
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