| 小贯小绿叶蝉半胱氨酸蛋白酶基因的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 于永晨,肖斌,孙晓玲.小贯小绿叶蝉半胱氨酸蛋白酶基因的克隆与表达[J].茶叶科学,2018,38(3):263-270. |
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| 作者姓名： | 于永晨 肖斌 孙晓玲 |
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| 作者单位： | 1. 西北农林科技大学,陕西 杨凌 712100; 2. 中国农业科学院茶叶研究所,浙江 杭州310008; 3. 农业部茶树生物学与资源利用重点实验室,浙江 杭州 310008 |
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| 基金项目： | 公益性行业(农业)科研专项经费(201403030),国家自然科学基金项目资助(31772180),浙江省"151"人才工程资助项目 |
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| 摘 要： | 半胱氨酸蛋白酶是植食性昆虫体不可或缺的重要水解蛋白酶之一。本文从小贯小绿叶蝉的转录组数据库中获得半胱氨酸蛋白酶基因Eocyp的基因片段的转录本序列,利用RACE技术得到其cDNA全长序列,利用生物信息学技术对Eocyp所编码的理论氨基酸序列进行分析,使用qRT-PCR技术检测Eocyp在小贯小绿叶蝉不同发育阶段,雌、雄成虫不同部位以及不同温度和光周期下的表达量。结果表明,小贯小绿叶蝉Eocyp的全长cDNA序列包含一个1β656βbp的开放阅读框,编码551个氨基酸,并具有由24个氨基酸残基组成的信号肽。推测其相对分子量为62.09βkD,预测其分子式为C2782H4163N737O835S25;理论等电点为6.02,不稳定系数为36.10。Eocyp具有半胱氨酸蛋白酶基因的典型特征,即催化三联体Cys357-His499-Asn519,同时具有ERFNIN,GNFD和GCDGG簇等保守结构域。Eocyp编码氨基酸序列与茶翅蝽CYP基因编码序列相似度最高。表达特征分析结果表明,Eocyp在小贯小绿叶蝉的各个生长时期均有表达,在5龄若虫时期达到最高;Eocyp在小贯小绿叶蝉雌、雄成虫的腹部均有较高的表达量;然而,Eocyp的表达量对于高、低温和不同光周期均无响应。这些结果为进一步研究Eocyp功能提供了理论依据。
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| 关 键 词： | 小贯小绿叶蝉 半胱氨酸蛋白酶 克隆 表达 |
| 收稿时间： | 2018-01-18 |
Molecular Cloning and Expression of a Cysteine Gene in Empoasca onukii |
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| YU Yongchen,XIAO Bin,SUN Xiaoling.Molecular Cloning and Expression of a Cysteine Gene in Empoasca onukii[J].Journal of Tea Science,2018,38(3):263-270. |
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| Authors: | YU Yongchen XIAO Bin SUN Xiaoling |
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| Institution: | 1. Northwest A&F University, Yangling 712100, China; 2. Tea Research Institute of Chinese Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310008, China; 3. Key Laboratory of Tea Biology and Resource Utilization of Ministry of Agriculture, Hangzhou 310008, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Empoasca onukii cysteine proteinase clone expression profile |
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