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重组酶Cre基因在大肠杆菌中的高效表达及其一步纯化和活性检测
作者姓名:王文棋  盖颖  陆海  蒋湘宁
作者单位:北京林业大学生物科学与技术学院;北京林业大学生物科学与技术学院;北京林业大学生物科学与技术学院;北京林业大学生物科学与技术学院
基金项目:中国科学院资助项目 , 科技部科研项目
摘    要:为了实现DNA重组酶Cre在体外的应用, 以pET-30a高效表达载体为基础构建了pTE30-Cre质粒.将此质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导的Cre基因的高效表达.对表达出的Cre重组酶蛋白进行镍离子鳌合法一步纯化,并以带有两个同向loxP位点的质粒为底物,对纯化出的Cre酶进行活性检测.该实验为Cre酶的体外应用奠定了基础. 

关 键 词:DNA重组酶Cre  pET30-Cre高效表达  一步纯化  Cre酶活性检测
文章编号:1000-1522(2006)03-0057-04
收稿时间:2005-03-20
修稿时间:2005-03-20
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