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巢式PCR检测琯溪蜜柚黑斑病病原菌
引用本文:郑域茹,罗金水,张汉荣,卢松茂,林智明,王宏毅,李美桂.巢式PCR检测琯溪蜜柚黑斑病病原菌[J].热带作物学报,2013,34(2):358-361.
作者姓名:郑域茹  罗金水  张汉荣  卢松茂  林智明  王宏毅  李美桂
作者单位:1. 福建省热带作物科学研究所,福建漳州,363001
2. 厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心,福建厦门,361026
3. 福建省农田建设与土壤肥料技术总站,福建福州,350003
基金项目:福建省公益类基本科研专项项目“琯溪蜜柚黑斑病巢式PCR检测技术的建立及应用”(No. 2012GY01);福建省自然基金项目“琯溪蜜柚黑斑病病原菌RFLP检测鉴定技术”(No. 2010J01113)。
摘    要:利用特异性引物从琯溪蜜柚黑斑病菌基因组DNA中扩增出一条分子量为487 bp的特异性条带,准确地与疮痂病、炭疽病和黄斑病菌等蜜柚常发性真菌病害区分开.采用巢式PCR对该引物的检测灵敏度进行测定,结果显示,对于黑斑病菌基因组DNA,巢式PCR的检测灵敏度为100 fg/μL,灵敏度比常规PCR至少提高100倍;对于发病组织,巢式PCR可从病斑组织含量为100 μg的DNA样品中检测到黑斑病菌.采用巢式PCR检测技术,可从蜜柚的黑斑病显症组织和未显症组织特异性地检测到病原菌,且检出率分别为96.67%和90%.

关 键 词:琯溪蜜柚  黑斑病  内部转录间隔区  巢式PCR  检测

Detection of Pathogens Causing Citrus Black Spot of Guanxi Honey Pomelo by Nested PCR
ZHENG Yuru,LUO Jinshui,ZHANG Hanrong,LU Songmao,LIN Zhiming,WANG Hongyi and LI Meigui.Detection of Pathogens Causing Citrus Black Spot of Guanxi Honey Pomelo by Nested PCR[J].Chinese Journal of Tropical Crops,2013,34(2):358-361.
Authors:ZHENG Yuru  LUO Jinshui  ZHANG Hanrong  LU Songmao  LIN Zhiming  WANG Hongyi and LI Meigui
Institution:Fujian Institute of Tropical Crops;Fujian Institute of Tropical Crops;Fujian Institute of Tropical Crops;Fujian Institute of Tropical Crops;Fujian Institute of Tropical Crops;nspection and Quarantine Technology Center, Xiamen Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Xiamen;Fujian Cropland Construction and Soil and Fertilizer Station
Abstract:
Keywords:Guanxi honey pomelo  Citrus black spot  ITS  Nested-PCR  Detection
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